常亮 杨蓉 刘素云 李拥军

    心肌肥大指心脏为适应机体做功的不断增加而发生的适应性反应，这种反应具有一定的代偿效果，能够维持甚至增加心输出量，但随着心肌肥大的发展，心肌氧耗量也会进一步增加，“代偿性”肥大终将发展为“失代偿性”心肌肥厚并出现心力衰竭。心肌肥大是高血压、冠心病、心肌病等多种心血管疾病的共同病理生理变化,发生发展涉及到诸多因素,机制尚未完全阐明。脂肪细胞因子是由脂肪组织分泌的一种血管活性物质，包括瘦素、肿瘤坏死因子、抵抗素、脂联素、白细胞介素等。内脂素是新近发现的一种脂肪细胞因子，具有促炎、促动脉粥样硬化及降低斑块稳定性等多种作用，是冠心病的独立危险因素[1]。近年有研究发现，血清脂联素、内脂素可作为临床预测PCI术后发生心力衰竭的指标[2]。但目有关内脂素在心肌细胞肥大过程中的作用研究较少。本研究通过动物实验，观察内脂素对心肌细胞肥大的影响及相关机制，结果如下。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 清洁级2～3 d日龄SD乳鼠，雌雄不限，由河北医科大学实验动物中心提供。

    1.2 主要试剂 多聚甲醛、辛伐他汀，美国Sigma公司；重组大鼠内脂素，Abcam公司;多聚-L-赖氨酸，Amresco公司；SP免疫组化试剂盒,美国ZYMED公司;DMEM培养基，GIBCO公司白酶干粉，Hyclone公司；胎牛血清，北京索来宝公司；双抗Invitrogen公司；5-溴脱尿苷，美国santa cruz公司；总RNA 提取试剂(Trizol),北京SBS公司；ROCK2，RhoA，Iκbα，p65，SIRT1兔抗鼠一抗及FK866、SN50、Y27632，美国santa cruz公司BNP兔抗鼠一抗，美国Abcam公司；琼脂糖凝胶，北京北方同正生物技术发展有限公司。

    1.3 主要仪器 倒置显微镜，日本尼康公司；无菌洁净工作台，北京半导体设备一厂；THZ-C台式恒温振荡器，江苏省太仓市实验设备厂；TGL-16B高速台式离心机，上海安亭科学仪器厂；ABI StepOne荧光定量PCR仪，美国应用生物系统(ABI)公司； GDS-8000 凝胶成像分析系统，美国UVP 公司。

    1.4 研究方法

    1.4.1 心肌细胞提取及培养:在无菌条件下，取2～3 d日龄SD乳鼠的心脏，取心尖区心室肌剪碎，用混合消化酶于37℃恒温振荡进行反复短时间的多次消化，每次消化后加入含10%胎牛血清的DMEM 培养基重悬细胞沉淀。结束消化过程后，收集离心后的心肌细胞 ......