江帆 刘宁 翟鑫 管频 董霄

    糖尿病性心肌病是由糖尿病患者引起的一种并发症，且能够引发心力衰竭、心律失常和休克，严重时可导致猝死，也是糖尿病患者死亡率较高的原因之一[1,2]。糖尿病性心肌病的发病机制受多种因素的制约和影响，心肌细胞凋亡、氧化应激是诱导糖尿病性心肌病的主要因素[3,4]。因此，寻找糖尿病性心肌病的治疗和诊断具有重要作用。长链非编码RNA是一类超过200个核苷酸的非编码RNA，不能够参与编码蛋白的合成，与心血管性疾病的发展密切相关[5]。Liu等[6]研究结果显示，LINC00528在心肌梗死模型细胞中表达上调，LINC00528通过调控miR-143-3p/COX-2轴抑制细胞增殖和促进细胞凋亡，但是对高糖诱导心肌细胞的研究机制尚不明确。核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路是细胞氧化应激的经典通路[7]，有研究发现，柚皮素能够通过激活AMPK/Nrf2/HO-1信号通路减缓糖尿病小鼠的心肌细胞的凋亡、炎性反应和氧化损伤[8]。本研究通过高糖诱导心肌细胞建立细胞损伤模型，探讨LINC00528是否能够通过调控Nrf2/HO-1信号通路影响高糖诱导心肌细胞凋亡和氧化应激。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与主要试剂 H9C2心肌细胞购买于南京凯基生物；胎牛血清、高糖DMEM培养基购买于美国Gibco公司；葡萄糖购买于美国Sigma公司；si-NC、si-LINC00528、pcDNA、Nrf2和引物购买于上海吉玛公司；Lipofectamine 2000试剂盒购买于美国Invitrogen公司；Trizol试剂盒、逆转录试剂盒、荧光定量PCR试剂盒购买于北京于天根生化公司；MTT试剂盒、凋亡试剂盒购买于上海碧云天生物；Bcl-2抗体、Bax抗体、Nrf2抗体、HO-1抗体、NQO1抗体和GAPDH抗体购买于美国Abcam公司；辣根过氧化物酶标记的二抗购买于北京中杉金桥公司；MDA试剂盒和SOD试剂盒购买于南京建成生物 ......