张嘉文 申婷 李海鹏 田秀明 许顺江 刘欣燕

    肺癌是一种恶性肿瘤，其原发病灶处于支气管黏膜或腺体，严重威胁人类的健康，是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一[1]。肺癌患者中约85%左右为非小细胞肺癌(non-small cell cancer，NSCLC)[2]。NSCLC患者没有明显的早期症状，往往发现时已到晚期，5年生存率只有5%左右[3]。即使在放化疗技术和自身免疫治疗技术普遍应用的情况下，患者5年内的生存率仍不超过15%[4]。预防和治疗肺癌的最好策略是早期诊断，因此寻找特异性高、侵入性小的肿瘤标志物为当务之急。外泌体miRNA作为癌症早期诊断的有效生物标志物日益受到关注。外泌体miR-17-5p和miR-21-5p的水平与卵巢癌的病理过程相关[5]。然而，检测外泌体miR-17-5p和miR-21-5p在NSCLC患者循环血中的水平及其诊断价值笔者尚未见报道。本研究通过检测miR-17-5p和miR-21-5p在NSCLC及良性肺结节患者血浆外泌体中的表达水平，进一步分析外泌体miRNA水平与NSCLC进展的关系，为寻找NSCLC的早期诊断的生物标志物提供实验依据。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集2020年6月至2021年5月在河北省胸科医院就诊的经支气管镜、肺穿刺活检或手术后病理确诊的NSCLC患者20例，均为初次诊断，未接受过放化疗及任何免疫治疗，经CT、超声等辅助检查手段排除合并其他部位的恶性疾病。同期收集来医院经抗感染治疗或观察2个月后胸部CT显示明显吸收的良性肺结节患者20例为对照组，患者入组前排除高血压、糖尿病、冠心病和慢性阻塞性肺疾病等全身慢性疾病，且未发现其他部位的恶性病变。

    1.2 主要仪器与试剂 (1)仪器：德国 Roche公司的实时荧光定量PCR仪、德国eppendorf公司高速(冷冻)离心机、美国Bio-Rad公司逆转录仪、美国Nanodrop公司紫外分光光度计等。(2)试剂：德国 Qiagen公司外泌体提取试剂盒、北京索莱宝公司彩虹180广谱蛋白Marker和BCA蛋白测定试剂盒、美国GeneCopoeia公司的RT-qPCR试剂和内参及目的分子引物等 ......