李刚 张达 张建秀

    宫颈癌是威胁女性健康的第二大癌症，放射及化学治疗的不良反应较大，中药有效成分在抗肿瘤方面有着多途径、多靶点、毒副作用小等优势，一定程度上可延长宫颈癌患者的生存期[1,2]。因此，开发可用于抗宫颈癌中药对其治疗具有重要意义。槐定碱是从豆科槐属植物苦豆子(sophora alopecuroides L)中提取的单体生物碱，具有显著的抗肿瘤作用，是一种高效低毒的抗癌生物碱；有研究报道槐定碱联合顺铂可以有效抑制卵巢癌细胞增殖，降低其恶性程度[3]。槐定碱可抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖和促进凋亡[4]。槐定碱可抑制肺癌A549细胞体外增殖和侵袭能力[5]。槐定碱通过靶向MAPKAPK2促进细胞自噬、凋亡和周期阻滞，从而抑制结直肠癌的发生与发展[6]。然而槐定碱对宫颈癌HeLa细胞生物学行为的影响及机制尚不清楚。有研究报道miR-5195-3p可能通过阻碍EMT通路抑制宫颈癌细胞SiHa的增殖，迁移与侵袭[7]。miR-5195-3p对神经胶质瘤细胞亦具有增殖抑制作用[8]。因此，本实验旨在探讨槐定碱对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制是否与miR-5195-3p有关。

    1 材料与方法

    1.1 材料 宫颈癌细胞株HeLa(上海冠导生物工程有限公司)；RPMI-1640培养基(浙江联硕生物科技有限公司)；槐定碱(纯度≥98%，江苏永健医药科技有限公司)；MTT试剂盒(大连美仑生物公司)；吉萨姆染色液(上海钰博生物科技有限公司)；Transwell小室、基质胶(美国康宁)；RIPA蛋白裂解液(上海北诺生物科技有限公司)；山羊抗兔IgG-HRP(美国GeneCopoeia)；E-cadherin抗体、N-cadherin抗体(武汉菲恩生物科技有限公司)；Trizol试剂、荧光定量PCR试剂盒(日本Takara) ......