王颖童 何宝花 张海霞 曹玉雯 贾肇一 孙印旗

    肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Spn)是常见的条件致病菌之一，正常情况下可寄生于口咽和鼻咽，其引起的细菌性肺炎是社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)的重要组成部分，国外报道中占CAP的15%～23.4%[1,2]。Spn在宿主免疫力下降时还可引发脑膜炎、败血症等侵袭性疾病(invasive pneumococcal disease,IPD)。Spn细胞壁上的细菌荚膜多糖(capsular polysaccharide,CPS)可保护菌体逃避宿主先天免疫反应，使病原菌可在宿主体内繁殖增长。根据CPS组成和结构不同，Spn可分为近100种血清型[3]，其中与IPD相关的仅有20余种，包括14，4，1，6，7F，23F，18C，19F等[4]。监测血清型别变迁和漂移有利于相关疾病的防控和诊疗。为抵御肺炎链球菌感染23 价肺炎链球菌多糖疫苗 (23-valent pneumococcal polysaccharide vaccine,PPV23)首先研发，但其对1 材料与方法

    1.1 实验菌株 本实验所用肺炎链球菌为2014至2018年收集的儿童病例来源菌株累计527株，其中按时间统计包括2014年182株、2015年123株、2016年111株、2017至2018年111株(2017和2018年收集菌株数量较少，为使计算结果、讨论趋势时组间基数相对平衡，将2年的数据合并为一组)。527株样品菌株分离来源包括：脑脊液、全血、硬膜下积液、胸水、各种穿刺液、痰、分泌物等部位。其中侵袭性菌株192株，占比36.43%，非侵袭性菌株335株，占比63.57%。采样病例中男335例，女192例，性别比1.74∶1；年龄分布为：24个月111例。全部菌株已使用PCR检测肺炎链球菌特异基因cpsA进行复核。

    1.2 仪器与试剂

    1.2.1 主要仪器：生物安全柜(型号：NU-430-600E)产自美国NUAIRE公司；CO2恒温培养箱(型号：MCO-18AIC)产自日本SANYO公司；比浊仪(型号：DENSIMAT)产自法国梅里埃公司；核酸提取仪(型号：NP968-C)产自中国天隆科技有限公司；PCR扩增仪(型号：DNA Engine PTC-200)产自美国Bio-Rad公司 ......