焦薇 郭娜 祖秀光 郝杰 孟明杰 谢亚囡 高伟年

    病理型心肌肥厚具有不可逆性，持续的肥厚最终导致心力衰竭。因此，靶向心肌肥厚是治疗心力衰竭的有效途径之一[1]。含与E6-AP羧基末端同源结构域的E3泛素化蛋白连接酶1(HECT Domain E3 Ubiquitin Protein Ligase 1，HECTD1)在调控细胞发育等方面起着非常重要的作用，但在其是否在心肌肥厚中也发挥重要作用有待确定。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammal target of rapamycin,mTOR)是一种进化保守激酶，调节一系列与新陈代谢和生长有关的细胞过程[2,3]。既往研究显示mTOR可以调节心脏生长以应对压力过载，并通过调节免疫细胞参与心肌肥厚，改变炎性反应和心脏肥大[4]。本研究主要探讨HECTD1 是否调节mTOR信号通路参与心肌细胞肥大的分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ)购自Millipore公司。辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)标记二抗购自中杉金桥。微渗透压泵(Osmotic pumps)购自美国ALZET公司。HECTD1抗体、磷酸化mTOR(p-mTOR)抗体、核糖体蛋白S6激酶B1(ribosomal protein S6 kinase B1，S6K)抗体、mTOR抗体和磷酸化S6K (pS6K) 抗体购自Cell Signaling Technology。电致化学发光液购自Millipore公司。本实验所有的细胞培养基购自 Gibco。胎牛血清购自Gibco。抗生素购自Gibco。RNA逆转录试剂盒购自赛默飞；RNA提取试剂盒购自Invitrogen公司。qRT-PCR引物由北京天一辉远生物技术有限公司合成。本研究中涉及到的心肌肥厚患者病理组织及对照样本收集于本科室 ......