LINC00511调控NF-κB通路对多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞凋亡和炎性反应的影响
试剂盒,1材料与方法,2结果,3讨论
卫玲 张燕 陈晓娟多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄女性最常见的内分泌疾病,主要表现为雄激素分泌过多、窦卵泡生长停滞和慢性炎症,其严重影响患者的生理和心理健康[1]。PCOS进展可能涉及遗传、内分泌、代谢等多种因素,但其确切发病机制仍不清楚[2]。卵巢颗粒细胞是卵泡中最重要的体细胞,可合成多种激素及生长因子,参与调控卵泡发育,而颗粒细胞异常凋亡、炎性反应可诱导PCOS病理进程[3,4]。因此,研究卵巢颗粒细凋亡机制、抑制细胞炎性反应对指导PCOS的临床治疗至关重要。长链非编码RNA(lncRNA)是长度>200 nt的RNA转录本,特定lncRNA的表达增加或缺失均可引起细胞基本活动异常,导致疾病进展。LINC00511是近年发现的致癌lncRNA,有研究报道其表达上调与宫颈癌的恶性状态有关,并可促进癌细胞的增殖和转移[5]。LINC00511还能促进乳腺癌细胞干性和肿瘤形成,其高表达提示乳腺癌患者预后不良[6]。然而,笔者查阅文献后发现LINC00511在PCOS中的功能尚不清楚。本研究分析LINC00511对PCOS卵巢颗粒细胞凋亡以及炎性因子表达的影响,以期为PCOS治疗提供新思路。
1 材料与方法
1.1 实验材料 人正常卵巢上皮细胞IOSE-80购自上海赛百慷生物公司;人卵巢颗粒细胞KGN购自深圳华拓生物科公司;PrimeScript逆转录试剂盒、SYBR Premix Ex Taq II试剂盒、TRIzol试剂购自大连takara公司;si-LINC00511、si-NC、pcDNA-LINC00511、pcDNA购自上海汉恒生物公司;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin-V-FITC)凋亡检测试剂盒购自南京碧波生物科技公司;人白细胞介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定(ELISA)检测试剂盒、人IL-6 ELISA检测试剂盒、兔源剪切型半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase-3)单克隆抗体(AC033)、兔源β-肌动蛋白(β-actin)单克隆抗体(AF5003)购自上海碧云天生物公司;磷酸化核因子κB(p-NF-κBp65 ......
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