miR-213靶向SRC调控胃癌细胞增殖和凋亡
货号,细胞系,试剂盒,1材料与方法,2结果,3讨论
刘亚峰 贺栋伟 石菲胃癌又称胃腺癌,是世界上第四大癌症类型,也是癌症相关死亡的第二大原因[1]。研究表明,胃癌发生与性别和年龄有关,男性发病率高于女性,>50岁人群中胃癌的发病率明显升高[2,3]。胃癌在亚洲、拉丁美洲、中欧和东欧的发病率较高[1]。由于在早期阶段,胃癌没有临床表现,许多患者在疾病的晚期才被诊断,因此胃癌的治疗效果欠佳[2]。虽然病理诊断和手术治疗是提高胃癌患者生存率的有效手段,但由于胃癌的复发和转移,胃癌患者的5年生存率仍然很低[3]。微小RNA(microRNA,miRNA)在许多疾病和病理生理过程中起至关重要的调节作用如肿瘤发生、白血病、心肌重塑、胚胎发育和造血干细胞分化等。越来越多的证据表明,miRNA对胃癌发生发展的有重要调节作用,miRNA代谢的紊乱可能是胃癌的潜在发病机制[4-6]。有研究表明,miR-213在乳腺癌、头颈部鳞状细胞癌和舌细胞癌中发挥重要的调控作用[7-10],而miR-213对胃癌的调控作用尚不明确。本研究探讨miR-213对胃癌细胞增殖和转移的作用及机制。
1 材料与方法
1.1 标本收集 收集2018年1月至2020年1月陕西省榆林市第一医院普外科住院行胃腺癌切除术患者30例的胃癌组织及癌旁正常组织。标本收集患者均知情同意并签署知情同意书后。纳入标准:术后病理确诊为胃腺癌,年龄40~70岁;排除标准:近5年间罹患高血压、糖尿病、冠心病及其他恶性肿瘤,有过胃肠道手术病史。
1.2 材料与仪器 澳洲胎牛血清(美国Gibco公司,货号:10100147)、低糖的DMEM细胞培养基(美国Gibco公司,货号:31330095)、I型胶原(美国Gibco公司,货号:A1048301);Lipofectamine 2000(美国Invitrogen公司,货号:11668030);miRNA核苷酸序列(miR-213序列)(生工生物公司);RNA的抽提试剂盒(日本Takara公司,货号:639505)、反转录试剂盒(日本Takara公司,货号:639549)、扩增试剂盒(日本Takara公司,货号:639503);q-PCR引物由生工生物公司合成;CCK-8细胞增殖检测试剂盒(碧云天公司,货号:b4758);EdU染色试剂盒(南京舟达生物科技公司,货号:zd2546);抗p-PI3K抗体(美国Abcam公司,货号:ab21475);抗PI3K抗体(美国Abcam公司,货号:ab21463);抗p-Akt抗体(美国Abcam公司 ......
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