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编号:274937
circ_0000218靶向miR-1278调控肺癌H1299细胞的增殖、迁移和侵袭
http://www.100md.com 2022年10月17日 河北医药 2022年第18期
荧光素酶,1资料与方法,2结果,3讨论
     王静 邵小美 谭德伦

    肺癌是较普遍的恶性肿瘤,是最常见的全球癌症相关死亡原因[1]。由于缺乏早期临床症状,大多数肺癌患者确诊时已为晚期,失去了最佳治疗时期。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是肺癌最常见的亚型,包括大细胞癌、鳞状细胞癌和腺癌,约占肺癌的85%[2]。不良饮食、吸烟、职业暴露和遗传易感性是非小细胞肺癌的主要危险因素[3]。尽管临床治疗手段已取得一定进展,但NSCLC患者预后仍较差,5年生存率较低。耐药性、肿瘤转移等是治疗NSCLC的主要障碍[4]。因此,亟待研究NSCLC病理机制和寻找新的治疗策略。环状RNA(circRNAs)是一种新型单链非编码RNA转录本,具有序列保守、结构稳定、丰度高和特异性高等特点[5]。研究发现,沉默circ_0000218可抑制喉鳞状细胞癌细胞活力,促进细胞凋亡[6]。circ_0000218高表达与大肠癌T分期和局部淋巴结转移增加相关,下调circ_0000218可抑制大肠癌细胞的增殖和转移[7]。过表达circ_0000218可促进肾细胞癌细胞的增殖和转移[8]。下调circ_0000218可抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭[9]。然而,circ_0000218在NSCLC中的作用笔者尚未见报道。Circinteractome预测显示,circ_0000218与miR-1278 之间存在核苷酸结合位点。有研究报道,miR-1278在肺癌细胞中低表达[10]。因此,本实验旨在研究circ_0000212在NSCLC中的作用以及其是否通过调控miR-1278表达影响NSCLC细胞H1299的增殖、迁移和侵袭。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取我院2017年1月至2019年1月经病理检测为肺癌患者30例,获得原发性肺癌组织及相应癌旁组织,患者均知情且同意,手术切除后立即将样本保存在-80℃。本研究经医院伦理委员会批准。

    1.2 材料 肺癌细胞株H1299购自购自中科院上海细胞库;DMEM培养液、胎牛血清、胰蛋白酶购自美国Hyclone公司;Trziol、反转录、qRT-PCR试剂购自美国Thermo Fisher公司;MTT 试剂盒购自美国Sciencell公司;Transwell小室日本Chemicon公司;RIPA蛋白裂解液、二辛可宁酸(BCA)和双荧光素酶报告基因检测试剂盒购自北京百奥莱博科技有限公司;Lipofectamine2000购自美国Invitrogen公司; ......

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