李超 王建欣 朱秀芳

    难治性癫痫约占癫痫病例的10%，具有治疗困难，病情易反复等特点[1]。治疗仍以药物治疗为主，托吡酯、左乙拉西坦(LEV)与卡马西平(CBZ)的联合治疗显示出明显的疗效，减少了癫痫发作频率并具有良好的安全性，通常是难治性癫痫一个有用的临床选择[2]。然而，这些抗癫痫药物的使用具有患者个体差异大、安全性低和毒性高等特点。因此，监测药物的血药浓度是临床实践中调整剂量、减少不良反应和确保疗效的一个重要指示。本研究在现有研究的基础上[3-14]，建立了一种基于HPLC-MS/MS的方法，用于快速、准确地测定难治性癫痫患者中托吡酯、左乙拉西坦和卡马西平的浓度。

    1 材料与方法

    1.1 仪器 美国AB SCIEX公司电喷雾离子源(ESI源)4000Q TRAP型质谱仪)；含液相输液泵、自动进样器和日本日本岛津公司的HPLC-30A液相色谱系统；美国SCILOGEX公司D3024型台式高速微量离心机。

    1.2 实验药品与试剂 托吡酯、左乙拉西坦及卡马西平对照品，均由成都德斯特生物技术有限公司提供，含量均≥98%，批号分别为：DST181230-023、DST190223-028和DST190228-318；；内标咖啡因内标，购自中国食品药品检定研究院，含量：99.9%，批号：171215-2010。空白血浆取自河北医科大学第一医院。

    1.3 方法

    1.3.1 色谱条件：色谱柱为Phenomenex Kinetex XB-C18，(2.6 μm，50×3 mm)；流动相为甲醇(A)-水(含2%的甲酸)(B)，按照以下梯度进行洗脱(0～2 min，30∶70→80∶20；2～4 min，80∶20；4～5 min，80∶20→30∶70)；流速为0.4 ml/min；柱温为40℃；进样量为5 μl。

    1.3.2 质谱条件：ESI源，正离子模式进行检测，MRM模式进行扫描；ESI源电压为5 500 V，ESI源温度为 600℃；气帘气压力为20 psi，辅助气压力为55 psi，雾化气压力为55 psi，碰撞气压力为High；毛细管入口和出口的电压都为10 V。见表1。 ......