程德刚 李福昌 任刚

    中药是一种强有效的辅助治疗手段，可用于临床治疗胰腺癌，其作用机制有待更深入的研究[1]。异泽兰黄素是从菊科蒿属植物中分离的一种黄酮苷元，具有抗炎，抗氧化，抗肿瘤等多种药理活性[2,3],可抑制miR-21的表达，通过激活AKT通路诱导肾癌786-O细胞凋亡[4],可通过靶向Akt /GSK3β和MAPK/ERK信号级联反应来抑制食管癌TE1细胞增殖[5],可通过抑制ERK通路抑制肝癌细胞SK-HEP-1增殖以及促进其凋亡[6]。然而异泽兰黄素对胰腺癌细胞SW-1990生物学行为的影响及机制尚不清楚。研究报道miR-138-5p上调可抑制胰腺癌细胞的增殖和转移[7]。lncRNA MCM3AP-AS1通过调节miR-138-5p促进胰腺癌细胞的生长和迁移[8]。生物学软件预测发现miR-138-5p与lncRNA DCST1-AS1有结合位点，DCST1-AS1可促进胶质母细胞瘤细胞的增殖[9]。抑制DCST1-AS1可通过增加miR-874-3p表达抑制子宫颈癌细胞的增殖，迁移和侵袭[10]。因此，本实验旨在研究异泽兰黄素对胰腺癌细胞SW-1990生物学行为的影响及机制是否与DCST1-AS1和miR-138-5p有关。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 胰腺癌细胞SW-1990(美国ATCC)；RPMI-1640完全培养基(武汉Procell)；异泽兰黄素(HPLC≥98%，滁州仕诺达生物)；CCK-8试剂盒(武汉博士德生物)；吉萨姆染色液(上海钰博生物)；Transwell小室、基质胶(美国康宁)；Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒、蛋白提取试剂盒(上海贝博生物)；荧光定量PCR试剂盒(德国Qiagen)；双荧光素酶报告基因检测试剂盒(上海碧云天)。

    1.2 细胞处理与分组 胰腺癌细胞SW-1990用RPMI-1640完全培养基培养，取对数生长期细胞，分别用2.5 μmol/L、10 μmol/L、40 μmol/L异泽兰黄素处理 ......