徐立 张旭然 张淼

    骨关节炎是以关节软骨发生退行性病变为主要病理特征的关节疾病[1]。IL-6等炎性因子的异常分泌可引起炎性反应[2]。软骨细胞凋亡等还可造成细胞损伤进而促进骨关节炎进展，白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)可影响软骨细胞凋亡、关节软骨细胞基质合成，参与骨关节炎进展过程，并可用于建立骨关节炎体外细胞损伤模型[3]。长链非编码RNA(lncRNA)在骨关节炎中表达异常，且富含微小RNA(miRNA)反应元件，并可通过调节miRNA表达而参与骨关节炎发生及发展过程[4]。LncRNA HAND2-AS1在类风湿性关节炎中表达下调，并可抑制类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖[5]。但HAND2-AS1在骨关节炎发生发展过程中的作用机制尚未可知。LncBase Predicted v.2预测到miR-106b-5p与HAND2-AS1与存在互补片段。miR-106b-5p在骨关节炎中表达上调，抑制其表达可减缓骨关节炎进展[6]。因此，本研究以IL-1β诱导人正常软骨细胞C28/I2模拟骨关节炎细胞损伤过程，探讨HAND2-AS1是否可通过靶向调控miR-106b-5p的表达从而影响IL-1β诱导的软骨细胞损伤。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选择2020年2～6月本院收治的17例骨关节炎患者为骨关节组，男9例，女8例；年龄52～70岁，平均年龄(61.12±5.11)岁；所有患者符合骨关节炎诊断标准。同时选取交叉韧带损伤患者17例为对照组，男10例，女7例；年龄53～70岁，平均年龄(62.35±3.16)岁。2组性别比、年龄差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

    1.2 材料与试剂 人正常软骨细胞C28/I2购自美国ATCC；IL-1β购自美国Sigma；DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、MTT、细胞凋亡检测试剂盒购自上海碧云天生物；Trizol试剂与Lipofectamine 3000 Transfection Reagent购自美国Invitrogen；pcDNA、pcDNA-HAND2-AS1、miR-NC、miR-106b-5p mimic、anti-miR-NC、miR-106b-5p Inhibitor购自广州锐博生物；IL-6、TNF-α检测试剂盒购自上海酶联生物；反转录与SYBR Green试剂盒购自北京天根生化 ......