蒋邦治 唐永刚 韩志安 陈林坤 韦家俊

    缺血性脑中风是常见的急性脑血管类疾病，也是造成残疾的主要神经系统疾病，氧化应激、炎性反应、细胞凋亡等系列病理过程参与其发生发展；神经保护治疗是缺血性脑卒中最重要、最有效的治疗手段[1,2]。研究表明lncRNA参与调控脑缺血后细胞凋亡、血管生成和炎性反应等系列过程，可作为缺血性脑卒中生物标志物[3]。脑源性神经营养因子反义RNA(BDNF-AS)是一种天然反义转录物，有报道精神分裂症患者血清中lncRNA BDNF-AS呈高表达，与认知能力相关指标密切相关[4]。下调LncRNA BDNF-AS表达对布比卡因诱导的幼脊髓背根神经节神经元的毒性损伤有保护作用[5]。沉默LncRNA BDNF-AS通过抑制细胞凋亡和氧化应激来减弱Aβ25-35诱导的PC12细胞神经毒性[6]。敲除LncRNA BDNF-AS可通过BDNF-TrkB-PI3K/Akt信号通路减弱缺氧/复氧诱导的神经细胞凋亡[7]。而LncRNA BDNF-AS对缺氧缺糖诱导的PC12细胞神经损伤的影响及机制尚不清楚。研究表明miRNA在缺血性脑卒中的发生与发展过程中发挥着重要作用，并参与了脑损伤后的保护和修复机制的调控[8]。敲低LncRNA FOXD3-AS1通过miR-765/BCL2L13轴防止脑缺血/再灌注损伤[9]。本实验研究LncRNA BDNF-AS是否通过调控miR-765影响缺氧缺糖诱导的PC12细胞神经损伤。为神经元损伤的机制以及防治药物研究提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料 PC12细胞(美国ATCC)；DMEM培养基(美国Gibco公司)；Trizol试剂、荧光定量PCR试剂盒(大连宝生物)；凋亡检测试剂盒、蛋白裂解液(艾美捷科技有限公司)；丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)；双荧光素酶报告基因检测试剂盒(上海翌圣生物) ......