赵维波 孔令甲 敬长春

    结直肠癌是常见的死亡癌症，已成发展为全球第四致命的癌症，每年约为90万人死亡[1]。在我国结直肠癌发病率和病死率均占肿瘤癌症的第五位，预计至2030年我国结直肠癌发病患者将达到40万例[2]。由于前期缺乏诊断的方法及治疗方式，导致5年预后较差[3]。白花丹素化学名为5-羟基-2-甲基-1,4-萘醌，是从药用植物白花丹根部提取分离而来的，具有抗肿瘤、抗炎等活性[4]。孙瑜针等[5]研究结果显示，白花丹素能有效抑制卵巢癌细胞的增殖和诱导细胞的凋亡，但是对结直肠癌细胞的研究相对较少。锌指E盒结合蛋白1(ZEB1)在胚胎转移分化中起到重要的作用，随着近年研究的不断深入，其具有致癌作用，在胃癌、乳腺癌等高表达，与浸润深度、淋巴结转移等有关[6,7]。钟轩等[8]研究结果显示，干扰ZEB1基因的表达能抑制结直肠癌细胞的增殖和转移，并促进细胞的凋亡。本研究体外培养结肠腺癌细胞SW480，探讨白花丹素是否通过调控ZEB1的表达影响结直肠癌细胞增殖、凋亡的作用。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与主要试剂 结肠腺癌细胞SW480购买于中国科学院上海细胞资源中心；胎牛血清、RMPI-1640培养基购买于美国Hyclone公司；白花丹素购买于上海博麦德生物，纯度≥98%；Lipofectamine 2000试剂盒购买于美国Invitrogen公司；si-NC、si-ZEB1、vector、ZEB1由上海吉玛公司设计合成；MTT试剂盒、凋亡试剂盒购买于北京索莱宝公司；Ki67抗体、p21抗体、Bax抗体、Bcl-2抗体、ZEB1抗体、GAPDH抗体购买于美国Abcam公司；BCA试剂盒、化学发光试剂购买于碧云天生物；HRP标记的IgG购买于北京中杉金桥生物。

    1.2 细胞培养与分组 SW480细胞常规复苏后，在含有10%胎牛血清的RMPI-1640培养基内，置于37℃、5% CO2培养箱中培养 ......