肖志博 金辉 谢海 符少川 葛树胜

    认知功能损伤是幼儿术后常见并发症，如何保护患者避免损伤一直是研究重点。益母草碱 (Leonurine,SCM-198,Leo) 是益母草中提取分离的生物碱，研究显示Leo是一种增强 BDNF/TrkB/CREB 信号传导并促进神经元存活的药物，对阿尔兹海默病模型小鼠行为学和生化指标具有正向调节作用[1]。此外，Leo可通过 c-Jun N 末端激酶途径发挥抗氧化作用，减轻脑出血中的水肿和神经炎症[2]。因此，Leo具有明显的中枢神经保护作用，然而，Leo对七氟醚麻醉幼鼠认知功能的保护作用和潜在的分子靶点仍不清楚。哺乳动物脑组织中，神经元之间的缝隙连接与其旁路蛋白形成了类似化学突触的“电突触”，维持了神经元活动的阈上和阈下同步，成为突触回路中重要组成部分。缝隙连接的分子底物是连接蛋白36 (connexin 36,Cx36)，其表达受钙调蛋白激酶 Ⅱ (calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ,CaMKⅡ)调控，具有促进突触间小分子如环磷酸腺苷、三磷酸肌醇和 Ca2+的跨膜转运的功能[3]。研究显示，Cx36敲除会导致海马和皮质中神经元缝隙连接丢失，影响神经元振荡活动[4]。此外，在认知功能障碍的老龄大鼠海马中可见明显的Cx36表达减少[5]。因此，本研究拟采用出生后7日龄幼鼠，吸入七氟醚麻醉后检测Cx36的表达。通过益母草碱给药，探究其对七氟醚诱导幼鼠认知功能的改善作用与机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 健康的SPF级SD大鼠母鼠及其所产乳鼠，乳鼠约7 d龄，体重10～15 g，60只，由海南药物研究所有限责任公司提供。饲养条件：温度(25±2)℃，湿度(55±5)%，昼夜循环12/12 h，订制孕鼠饲料，自由饮水，母鼠与其乳鼠同窝喂养。

    1.2 实验分组与方案 乳鼠在7日龄时以3%七氟醚麻醉，持续6 h。将麻醉后乳鼠随机分为七氟醚组、益母草碱-低剂量组(益母草碱-L,2.5 mg/kg)、益母草碱-中剂量组(益母草碱-M,5 mg/kg)、益母草碱-高剂量组(益母草碱-H,10 mg/kg)，对照组乳鼠仅吸入载体空气，持续3 h，每组12只。乳鼠麻醉后每日腹腔注射对应剂量的益母草碱 ......