武会斌 王皇建 王云帅 夏添明 李朝辉 韩保卫

    虽然近年来肿瘤诊治技术取得了巨大进展，但由于晚期复发和转移，结直肠癌(colorectal cancer，CRC)的5年生存率依然很不满意[1]。因此，研究与CRC进展相关的分子标志物，寻找新的治疗靶点，在改善CRC患者的预后中具有重要意义。肿瘤微环境(tumor microenvironment，TME)由肿瘤细胞、血管内皮细胞、免疫细胞和细胞外基质等间质成分及其分泌的细胞因子构成[2]。肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages，TAMs)是TME中最丰富的免疫细胞群[3]，肿瘤干细胞(cancer stem cell，CSCs)生态位也是TME的重要组成部分[4]。因此，本研究应用免疫组化的方法检测TAMs标志物CD68和CSCs标志物CD166在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的蛋白表达水平，探讨其与临床病理特征及预后的关系，旨在为CRC的治疗及预后判断提供重要参考依据。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取2014年1月至2019年10月在郑州大学附属洛阳中心医院接受手术治疗的CRC患者148例。其中男84例，女64例；年龄32～87岁，中位年龄62岁；结肠癌65例，直肠癌83例；肿瘤直径5 cm)，体积分数10%甲醛固定12 h，石蜡包埋，4 μm厚切片，60℃下烤片60 min，常规脱蜡水化。3%双氧水覆盖玻片，避光、室温下封闭10 min，灭活内源性过氧化物酶，双蒸水冲洗3次。玻片完全浸润于柠檬酸盐缓冲液(0.01 mol/L，pH值6.0)中，微波炉抗原修复15 min，室温冷却，磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗10 min。免疫组化笔圈出组织固定范围，用山羊血清封闭液覆盖玻片，室温封闭孵育20 min后 ......