下调TP53INP1基于PI3K/AKT/mTOR信号通路对宫颈癌细胞凋亡、侵袭、迁移的影响
1材料与方法,2结果,3讨论
龙燕 李卉 吴玲艳宫颈癌为临床常见恶性肿瘤,可对女性的生命健康造成威胁,宫颈癌临床发病率逐年上升,一般性生活紊乱、早婚、早育及多产的女性患病率极高,鉴别疾病时可通过各项症状及体征与子宫的其他肿瘤等进行鉴别[1,2]。临床对于宫颈癌的诊断与治疗尚未发现有效的治疗手段,部分患者预后身体状况较差。近年来研究表明,对TP53INP1基因进行调控可用于宫颈癌的诊断与治疗,且TP53INP1在机体多种生理疾病中具有重要作用,可参与多种恶性肿瘤的发生与发展[3,4]。临床关于TP53INP1与宫颈癌的关系研究较少,仅有李明如等[5]研究显示TP53INP1高表达于宫颈癌患者。基于此,在本文中分析下调TP53INP1基于PI3K/AKT/mTOR信号通路对宫颈癌细胞凋亡、侵袭、迁移的影响,为宫颈癌的诊断与治疗提供新的方向。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器 宫颈癌细胞株购于苏州瑞诺德生物科技有限公司;PI3K、AKT、mTOR抗体购于武汉益普生物科技有限公司;PCR扩增仪以及Western blot电泳仪均购于美国Bio-Rad公司。
1.2 方法
1.2.1 临床标本收集与细胞培养:将宫颈癌细胞放置在RPMI 1640培养基于37℃ 5% CO2饱和湿度环境下培养。
1.2.2 细胞转染与分组:应用Lipofectamine2000试剂将TP53INP1 inhibitor及TP53INP1 mimics转染宫颈癌细胞,分为上调组和下调组,转染24 h后将细胞正常培养,并于-80℃保存,供后续实验使用,而对照组不做任何特殊处理。
1.2.3 TP53INP1检测:采用实时荧光定量PCR测定TP53INP1表达量 ......
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