杨小周 张灵强 王凯强 王晶晶 樊海宁 阳丹才让

    据统计，全球每年新增的癌症病例有1 810万例，因癌症死亡的患者有960万例，其中肝癌每年约新增确诊病例84.1万例，肝癌死亡患者约42.21万例，严重威胁到人类的健康[1,2]。肝细胞癌(HCC)作为世界范围内最常见的消化系统恶性肿瘤，早期预后良好，因此高危人群进行早期诊断对于降低病死率具有重要意义。目前，HCC诊断主要依靠影像学、血清甲胎蛋白以及活体组织检测；然而影像学和血清检查在诊断中的准确性和敏感性存在局限性，而活体组织检查因其有创性、存在种植转移风险而受到临床应用的限制[3]。因此，找到一种可靠的方法用来检测早期HCC并检测肿瘤复发是至关重要的。近年来，液体活检标本检查技术在癌症的早期筛查诊断方面展现出一定的优势，是指对血液或其他液体进行微创和非侵入式检查，可以得到患者肿瘤的遗传信息[4]。因此，液体活检在早期诊断、预测治疗反应、监测疾病复发、识别靶向治疗的耐药机制等方面具有重要的临床意义。液体活检的肿瘤信息来源包括循环肿瘤DNA(ctDNA)、循环肿瘤细胞(CTCs)以及来自体液(如血清、血浆、尿液、唾液等)的循环miRNAs以及循环外泌体，其中ctDNA/cfDNA是最常见用于分析的生物标志物[5,6]。本文重点介绍作为液体活检重要成分的CTCs和ctDNA对于HCC诊断、预后以及治疗中的临床应用和价值。

    1 CTCs

    1.1 CTCs概述 CTCs通常被认为是肿瘤的“种子”，它可以随着人体内循环从肿瘤的原发性病灶进入到外周循环中并最终转移至其他器官上形成转移性肿瘤[7]。理论上而言，循环肿瘤细胞是有效的早期肿瘤标记物。1869年，Ashworth[8]首次从乳腺癌患者血液中证实了CTCs的存在。随后，许多专家和学者对Ashworth的发现进行了验证，从各种癌症患者的外周血中发现了CTCs。CTCs的数量与肿瘤负荷呈正相关，肝细胞癌分期越早，CTCs的数量就越少。CTCs在人血液中存在的时间较短(半衰期：1～2.4 h)，因此若原发性肿瘤在切除之后的数月或数年还能够在患者血液中检测到CTCs则证明肿瘤复发或发生了转移。从全血中获取CTCs较为复杂，但是从CTCs中能够获取肿瘤细胞DNA、RNA以及蛋白质水平等相关信息。即便如此，将CTCs应用于临床肿瘤特性监测仍然具有一定的局限性，主要是由于CTCs在进入血液循环后，会受到血流动力学的剪切力、细胞外基质的黏附力、机体免疫系统的攻击以及靶向治疗药物等作用的影响发生凋亡，能够幸存并释放到血液中的CTCs仅有不到0.01%能够产生转移[9] ......