包慧琦 高雅 王莉

    牙周膜细胞结构主要为胶原纤维,也被称为牙周韧带,可以固定牙齿,是位于牙根与牙槽骨之间的结缔组织,血管丰富,有丰富的感觉神经神经末梢,极为敏感,在牙齿受到咀嚼压力时,可以缓解压力,缓冲外来的力量不直接在牙槽骨作用,可以形成牙槽骨、牙骨质,具有破坏后重建功能,牙周组织对于垂直方向作用力有强大的抵抗能力,侧方压力作用较弱,容易受到损伤,牙周膜细胞凋亡则会引起各种不良反应[1-3]。脂多糖是脂质和多糖复合的产物,是革兰阴性厌氧菌中的一种致病物质,亦是革兰氏阴性菌细胞壁外壁的主要成分,具有独特的难渗透性,可以有效帮助细菌细胞抵御外界有害刺激,避免胞膜受到攻击,具有抗原性,可以稳定整个胞膜的结构,为细菌的结构完整性做出了巨大贡献,但是脂多糖可以加快蛋白的表达,可以加快炎性细胞因子与其他炎性介质的合成、释放,引起炎症反应,加快细胞的凋亡[4,5]。白藜芦醇是遭受真菌病害感染反应后分泌的一种抗毒素,是一种天然的抗氧化剂,可以在葡萄的叶子和葡萄皮中反应合成,具有抗氧化、抗炎、免疫调节,保护心血管的功能,可以在肝脏内迅速代谢,有益于人类生命健康[6,7]。基于此,本文探究通过调节白藜芦醇浓度对脂多糖诱导的牙周膜细胞凋亡的调控及对p38 MAPK/NF-κB信号通路的影响,并对其作用机制进行分析,为临床研究牙周膜细胞凋亡提供了新道路。

    1 材料与方法

    1.1 材料 细胞:人牙周膜细胞HPDLF购于上海弘顺生物科技有限公司。主要试剂:RPMI-1640培养基试剂盒(艾美捷科技有限公司,货号:RPP11-10LT);RIPA裂解液(北京普利莱(APPLYGEN)基因技术有限公司,货号:C1055-100);Heochest 33258染色制剂试剂盒(深圳子科生物科技有限公司,货号:ZK-L0597);p38 MAPK/NF-κB试剂盒(武汉琼格生物科技有限公司生产;货号:EH3422)。

    1.2 方法

    1.2.1 牙周膜细胞培养:将牙周膜细胞放入含10%胎牛血清、青霉素100 U/ml、酶联素100 μg/ml的RPMII-1640培养液中,并将培养液放入温度为37℃、5%CO2、的培养箱中进行培养,每间隔1 d～2换1次新鲜培养液,细胞贴壁80%～90%时,将培养基除去,进行传代培养,1周进行3次,选择生长较的对数生长期细胞进行后期实验 ......