白布加甫·高娃 热依汗古丽·阿不来提 林凯

    重度抑郁症 (major depression disease,MDD) 是一类常见的精神疾病,该病影响着大约 20%的世界人口[1]。睡眠功能障碍是抑郁症患者的重要特征[2]。睡眠剥夺诱发抑郁样行为的小鼠前额叶皮层与海马体中都有检测出结构缺陷,伴随着树突棘密度与长度的降低[3]。此外,树突棘结构的动态变化也被发现与小鼠抑郁样行为表现密切相关[4]。因此,通过提高神经发生途径来提高神经元结构可塑性将有利于MDD治疗。TWIST1 是一种高度保守的碱性螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix)结构转录因子[5]。此外,TWIST1是一种促癌基因,通过EMT作用,促进多类癌症侵袭,转移与恶化。由于癌症患者罹患抑郁症的风险提高[6],且TWIST1在神经元中亦存在表达,因此,TWIST1可能与神经元生理改变相关。一项研究表明,TWIST1 在神经元中的高度表达是突变亨廷顿蛋白诱导的神经元死亡的重要上游介质[7]。因此,本研究拟探索TWIST1是否通过抑制神经发生降低神经元结构可塑性,造成睡眠剥夺小鼠抑郁样行为。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料与仪器 Lipofectamine 3000 试剂盒(美国Invitrogen公司,128231);5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc,BrdU,美国Sigma公司,135210);Anti-mouse BrdU抗体(英国abcam公司,ab7231);Anti-mouse TWIST1、Anti-mouse Wnt3a与Anti- mouse β-catenin抗体(北京博奥森生物科技公司,bs13598、bs13832、bs13384);Alexa flour 488 Goat anti-rat IgG(H+L) (武汉三鹰生物科技公司,193822);HRP conjugated goat anti mouse/rabbit IgG(H+L)(上海碧云天生物科技公司,b183237、b277372)。悬尾测试设备、强迫游泳测试设备、旷场测试设备、Morris水迷宫设备(江苏赛昂斯公司,SA210、SA209、SA224、SA204);倒置荧光显微镜(美国OLYMPUS公司,IX53);凝胶电泳装置(美国BioRad公司,Mini-protean Tetra);膜片钳系统(瑞士Axon公司,型号：MultiClamp 700B,MultiClamp 1550B);化学发光成像仪(上海天能生物公司,1600/1600R) ......