李小玲 钟小兰 方志敏 刘顺民 刘兆平

    急性心肌梗死(acute myocardial infraction,AMI)是临床常见的心血管疾病危重症之一,具有发病突然、病死率高的特点,当前经皮冠状动脉形成术及血管紧张素转换酶抑制剂等药物的应用有效降低了AMI患者病死率[1]。但心肌细胞是一种终末分化细胞,死亡后不可再生,而AMI后心肌组织释放多种自身抗原,导致机体自身免疫反应,诱发一系列炎性反应,对心肌细胞产生负性作用,引起心功能进行性障碍,最终影响患者预后并增加患者猝死风险。因此,寻找缓解AMI所致炎性反应的有效药物或靶点是医药研究工作者的重要课题[2-4]。天麻素(gastrodin)是提取自中药兰科天麻属植物天麻块茎的主要有效成分,具有抗菌、抗炎、抗氧化等广泛的药理作用[5]。Liu等[6]研究显示,天麻素可抑制动脉粥样硬化小鼠早期炎性反应。杨伟等[7]研究报道,天麻素可通过抑制炎性反应和氧化应激减轻心脏缺血再灌注损伤,但天麻素作用于AMI的效果及作用机制尚不清楚。因此,本研究制备AMI大鼠模型,探究天麻素对AMI诱导的炎性反应的影响并探讨其相关分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 清洁级雄性SD大鼠,6～8周龄,体重180～200 g[新疆医科大学实验动物中心,实验动物许可证号:SCXK(新)2018-0002]。置于恒温25℃动物房分笼饲养,12 h明暗交替,自由进食、饮水。天麻素(纯度≥98%,上海阿拉丁生化科技股份有限公司);戊巴比妥钠(上海思域化工科技有限公司);肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒(武汉华美生物工程有限公司);2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenytetrazolium chloride,TTC)染色试剂盒、苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色试剂盒(南京森贝伽生物科技有限公司);RIPA裂解液、BCA试剂盒(上海碧云天生物技术研究所);兔抗肌醇依赖性激酶1α(inositol requiring enzyme 1α,IRE1α),磷酸化IRE1α(p-IRE1α)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(tumor necrosis factor receptor associated factor 2,TRAF2)、p65、磷酸化p65(p-p65)抗体、鼠抗β-actin抗体、辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG、羊抗鼠IgG二抗(美国Abcam公司) ......