黄建军 石莺 刘泉 陈忠益 曾国庆 赵柏阳

    软骨肉瘤作为发病率排名第二的原发恶性骨肿瘤,对放化疗具有很强的抵抗作用,外科手术治疗术后易出现复发和转移,使得预后效果较差[1],严重危及患者生命。因此,探索并阐明软骨肉瘤的发生发展机制,寻找有效的治疗靶点是治疗软骨肉瘤的重要策略。受体酪氨酸激酶样孤儿受体2(receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 2,ROR2)是受体酪氨酸激酶家族(RTKs)成员之一,参与体内细胞增殖调控、凋亡、分化、黏附、迁移等多种重要的细胞生理活动,在动物发育的形态发生及组织分化过程中发挥重要作用[2]。研究表明,ROR2参与调节成骨细胞的存活和分化从而影响骨发育和重塑[3,4]。正常组织中ROR2的表达水平较低,而在多种肿瘤组织或细胞(如慢性淋巴细胞性白血病、恶性黑色素瘤、头颈鳞癌、卵巢癌、乳腺癌、肾癌等)中呈高表达,并加速肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡等过程[5-8]。我们前期的研究发现ROR2在骨肉瘤组织及细胞中有较强表达,并可能促进了骨肉瘤的发生发展及恶性生物学行为[9,10]。但笔者发现ROR2在软骨肉瘤中的功能尚不清楚。本实验拟采用体外培养人软骨肉瘤SW1353细胞,应用小干扰RNA(SiRNA)特异性下调SW1353细胞中ROR2的表达水平,观察其对软骨肉瘤SW1353细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,以期为软骨肉瘤的临床治疗提供新的靶点。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 人软骨肉瘤细胞系SW1353购于美国ATCC公司;RPMI-1640培养基、胎牛血清购于美国Gibco公司;Lipofectamine 2000转染试剂盒购于美国Thermo Fisher Scientific公司;Trizol试剂、逆转录试剂盒、BCA蛋白定量试剂盒、化学发光试剂盒、CCK-8试剂盒及RIPA裂解液购于碧云天生物公司;鼠抗人ROR2单克隆抗体购于美国novus公司;Transwell小室购自美国Corning公司 ......