黄昱刚 谭伶娟 陈广 郭菁

    环状RNA(circular RNA,circRNA)是以共价键形成的一种环状结构的非编码RNA分子,研究表明circRNA在肺癌中表达异常,并可能通过充当微小RNA(miRNA)的海绵分子而调节肺癌细胞生物学行为[1,2]。circ_0001368在肾细胞癌组织和细胞中表达下调,既可阻碍肾癌细胞增殖,又可抑制其侵袭[3]。Circular RNA Interactome证明miR-616和circ_0001368具有结合位点。研究表明miR-616在非小细胞肺癌组织和细胞中表达增加[4]。但上游非编码基因如何调控miR-616表达进而参与肺癌发生发展过程并不清晰。故开展本研究,以评价circ_0001368经靶向调节表达miR-616调控肺癌细胞的可能性。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 纳入2019年11月至2020年2月本院收治的47例肺癌患者的肺癌及癌旁组织标本,其中男28例,女19例;年龄53～66岁,平均年龄(58.32±3.26)岁。

    1.2 材料与试剂 人肺癌细胞A549购自上海匹拓生物;DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、CCK-8试剂(于上海碧云天生物购进);反转录与荧光定量PCR试剂(于大连宝生物工程购进)购自;LipofectamineTM3000 Transfection Reagent(于美国Invitrogen购进);双荧光素酶报告基因载体及其活性检测试剂盒(于美国Promega购进)购自美国;山羊抗兔IgG二抗、兔抗E-cadherin与N-cadherin抗体(于美国CST购进)。

    1.3 方法

    1.3.1 本研究细胞转染及分组方式:A549细胞用DMEM培养基(含10%胎牛血清、双抗)和37℃、5% CO2培养箱 ......