曹冰 张静 陆晨

    糖尿病肾病(diabetic kidney disease)是糖尿病患者严重的微血管并发症之一,也是目前导致终末期肾病发生的主要原因之一。目前治疗糖尿病肾病的最佳治疗措施包括严格控制血糖、血压及降低尿蛋白的排泄,虽然该病的治疗方案选择性很多,但这并没有使糖尿病肾病发病率降低。钠葡萄糖共转运体2(sodium-glucose cotransporter 2,SGLT2)抑制剂是一种新型的糖尿病治疗药物,研究表明SGLT2抑制剂具有降糖、降压、降低蛋白尿排泄、改善肾纤维化等肾脏保护作用[1]。研究证实,转化生长因子β1(transforming grouth factor beta 1,TGF-β1)合成增加的许多原因是由于高血糖的作用,TGF-β1可导致基底膜增厚、系膜基质增生及肾小球结节性硬化的发生,促进肾脏纤维化发生,与此同时,结缔组织生长因子(connective tissue grouth factor,CTGF)也是一种新的促进纤维化生长因子,它的表达在一定程度上受到TGF-β1的调节,在糖尿病肾病的组织中表达量增加,参与致肾脏纤维化的作用中。有研究表明SGLT2抑制剂可通过抑制糖尿病大鼠肾脏 TGF-β1的水平对大鼠的肾脏存在保护作用[1]。卡格列净为目前临床应用的SGLT2抑制剂之一,本实验通过建立对照组、糖尿病肾病组、卡格列净干预组3种大鼠模型,分别给予蒸馏水及卡格列净药物干预,观察大鼠血糖变化、尿蛋白变化情况,同时评价卡格列净对糖尿病肾病的保护作用机制及对TGF-B1及下游因子CTGF表达的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 由新疆医科大学第一附属医院动物饲养中心提供SPF级雄性 Wistar 大鼠共28只,于新疆医科大学动物实验中心进行繁育。选8～10周龄,体重200～250 g进行饲养。饲养温度(23±3)℃,相对湿度40%～70%。该研究通过新疆医科大学实验动物伦理委员会审批,伦理审批号:IACUC-20210425-14。

    1.2 主要试剂 (1)45%高脂饲料(日粮型,大鼠)、普通饲料(对照组)(江苏协同公司);(2)链脲菌素(sigma公司);(3)卡格列净片(规格100 mg,生产企业:Janssen-CilagS.p.A.意大利);(4)RIPA裂解液、蛋白酶抑制剂(博士德公司);(5)山羊抗兔IgG H&L (HRP)、山羊抗小鼠IgG H&L (HRP)(Abcam公司);(6)Rabbit Anti-TGF beta 1 antibody、Rabbit Anti-CTGF antibody等(博奥森公司) ......