闫晓红 方美花 王伟 张军

    骨肉瘤也称为骨癌,在青少年中发病率最高,复发或转移患者生存率低,靶向治疗骨肉瘤药物的研发及临床应用已经取得一定疗效,仍需从基因层面寻找精准的靶向治疗药物[1,2]。研究表明miRNA在骨肉瘤的诊断、治疗和预后中起着重要作用[3]。有研究报道,miR-330-3p在骨肉瘤组织和细胞系中的表达降低,miR-330-3p过表达显著抑制MG-63和U2OS骨肉瘤细胞的生长[4]。circ_0032463通过调节miR-330-3p/PNN轴促进骨肉瘤的进展[5]。生物学软件预测发现circ_0003221与miR-330-3p有结合位点。有研究报道circ_0003221(circPTK2)促进膀胱癌细胞的增殖和迁移[6]。circPTK2在胃癌组织和细胞中上调表达,下调circPTK2抑制胃癌肿瘤的生长和转移[7]。然而笔者发现circ_0003221对骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响尚不清楚。本试验旨在研究circ_0003221是否通过调控miR-330-3p影响骨肉瘤细胞增殖和迁移,报告如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取2017年1月至2021年1月我院收治的37例骨肉瘤患者,通过手术取其瘤组织、瘤旁组织,患者均知情且同意。

    1.2 细胞与主要试剂 U2-OS细胞(美国ATCC);RPMI-1640培养基、MTT试剂盒(美国Sigma公司);Trizol试剂、荧光定量PCR试剂盒(大连宝生物);Transwell小室(美国康宁公司);双荧光素酶报告基因检测试剂盒(美国AAT Bioquest)。

    1.3 细胞处理与分组 U2-OS细胞常规培养于RPMI-1640培养基中,取对数生长期细胞,将si-NC、si-circ_0003221、miR-NC、miR-330-3p mimic分别转染至U2-OS细胞,记为si-NC组、si-circ_0003221组、miR-NC组、miR-330-3p mimic组;将si-circ_0003221分别与anti-miR-NC、miR-330-3p Inhibitor共转染至U2-OS细胞,记为si-circ_0003221+anti-miR-NC组、si-circ_0003221+miR-330-3p Inhibitor组 ......