王崇 王丽娴 秦娜 秦云静 袁茵 赵建宏

    连续计数法血小板功能检测(sequential platelet counting method,SPCM)是国内于2012年研发的一种基于库尔特原理的新型血小板聚集功能评价实验[2],其检测原理为:通过连续动态测量全血标本在添加诱聚剂(Agonist)前后血小板数量及体积变化,综合分析血小板最大聚集率(maximum aggregation rate,MAR)、平均聚集率(average aggregation rate,AAR)、最大聚集时间(maximum aggregation time,MAT)、血小板聚集曲线(platelet aggregation curve,PAC)、血小板抑制率(PLT inhibition rate,INH)、血小板平均抑制率(PLT average inhibition rate,A-INH)、红细胞最大聚集率(RBC maximum aggregation rate,R-MAR)等参数,对血小板在不同诱聚剂诱导下的聚集功能进行较为全面的评价[2,3],进而指导临床选择患者较为敏感的抗血小板药物。本文拟对连续计数法血小板功能检测与其他方法进行比较,分析各自优缺点,并对SPCM的影响因素及质量改进提出建议。

    1 方法学比较

    1.1 SPCM与LTA LTA做为一种传统的血小板聚集功能实验,最初由Salzman于1960年提出[4],其原理为通过离心将标本分为富血小板血浆(Platelet rich plasma,PRP)和贫血小板血浆(Platelet poor plasma,PPP),用PPP将PRP的血小板计数调整至250×109个/L,在其中加入不同种类的诱聚剂,如花生四烯酸(arachidonic acid,AA)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、胶原(Collagen,Col)、肾上腺素(Epinephrine,EPI)等,诱导血小板聚集,引发血浆浊度变化,通过检测血浆透光率的动态变化,计算血小板聚集率。其优点是:市场应用广泛,临床认可度高,试剂价格相对较低;检测结果准确、重复性好,血浆浊度变化的检测为不间断连续线性测定,能准确捕捉到透光率最大、浊度最低、血小板最大聚集的时间点。但亦有明显的缺点,因其检测血浆浊度变化,一些影响血浆透光度的因素,均会对检测结果产生影响;标本检测前需要离心,会诱导血小板活化,且分离血浆,去除红、白细胞后,非全血环境,不能准确、全面反应血小板在体内活化、粘附、聚集功能;因实验前需要对标本进行提取贫、富血小板血浆等手工操作,检测人员操作的熟练程度对结果会有影响,不利于实验操作全过程自动化;不同实验室间、不同实验操作人员对同一份标本的检测结果也会有差异 ......