王适 胡立志 王珊 左姿 王敏

    急性软组织损伤是临床常见的运动损伤,其特点是疼痛、局部水肿、瘀伤、肌纤维断裂和肢体活动障碍[1]。此外,此类损伤可造成局部皮下软组织出现一系列急性挫伤或/和撕裂,严重影响患者的生活质量[2]。目前,针对急性软组织损伤的治疗主要以对症处理为主,仍无特效药。西医多通过联合应用西药来改善患者疼痛,减轻肿胀,虽然有一定疗效,但弊端也日渐明显[3]。因此,开发安全高效的药物来改善急性软组织损伤具有重要的意义。化瘀止痛贴膏为湖南中医药大学第二附属医院院内制剂,具有化瘀解毒,消肿止痛之功效。已有研究报道,化瘀止痛贴膏治疗急性软组织损伤所致肢体肿痛患者的临床效果良好[4]。但具体机制尚不明确。相关研究显示,抑制Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路可减轻膝骨关节炎兔软骨组织损伤[5]。但化瘀止痛贴膏能否通过调控Wnt/β-catenin信号通路改善大鼠急性软组织损伤尚不明确。因此,本研究主要探究化瘀止痛贴膏对急性软组织损伤大鼠的影响以及其作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 96只雄性SD大鼠(210～220 g),6周龄,由广东莱迪生物医药研究院有限公司提供,生产许可证号SCXK(粤)2022-0064。所有动物实验经本院动物保护与使用委员会批准进行。

    1.2 主要试剂 化瘀止痛贴膏医院自制;精制狗皮膏购自重庆陪都药业股份有限公司;氯化锂(Lithium chloride monohydrate,LiCl)购自上海源叶生物科技有限公司;大鼠肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β ELISA试剂盒均购自上海烜雅生物科技有限公司;兔源一抗Wnt-16、β-catenin、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-3、MMP-13、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)、GAPDH及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔二抗均购自英国Abcam公司。

    1.3 急性软组织损伤大鼠模型的构建 2%戊巴比妥钠麻醉大鼠,脱去大鼠右侧大腿毛发,将大鼠仰卧位固定,在大鼠右后肢下垫海绵垫以防骨折,再用500 g砝码连续6次自20 cm处高度垂直自由落下击打大鼠大腿骨直肌部位,以构建急性软组织损伤大鼠模型[6] ......