冯丽 贺慧敏 程林

    缺血性卒中发生时因脑血流不足而引起的脑组织缺血性坏死。在当下心脑血管疾病发病率不断增加的的背景下缺血性卒中的发病率持续增高。由于脑对血液供给的敏感性,即使短期的血液闭塞也可导致对神经元产生不可逆的损伤,并且大多数患者遭受随之而来的神经功能障碍和认知功能障碍[1]。虽然美国食品药品监督管理局证明重组组织型纤溶酶原激活剂(tPA)可用于缺血性卒中治疗中闭塞血管的再通,但tPA介导的有效溶栓治疗窗较短,80%的患者因缺乏最佳溶栓治疗而出现严重后遗症甚至死亡[2]。此外,溶栓治疗也增加了患者颅内出血的风险,极大地限制了其临床应用。目前,卒中的预防和治疗仍然具有挑战性,有必要找到与之相适应的神经保护药物,确定合适和有效的治疗策略,这对减轻脑缺血的神经损伤具有重要意义。桔梗皂苷D(platycodin D,PLD),传统中草药的主要生物活性成分之一,是一种齐墩果烷型三萜皂苷,具有两条糖链;在苷元的C-3位连接一个葡萄糖基,在C-28位连接其他4个糖残基链[3]。已被证明调节许多涉及凋亡、炎症、氧化应激的生物过程[4]。先前的研究证明了预处理桔梗皂苷D降低了低氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞的损伤[5]。然而,桔梗皂苷D在预防和治疗脑缺血损伤中的功效仍不清楚。因此,为了进一步确定桔梗皂苷D的用途,我们建立了局灶性脑缺血再灌注损伤模型,探讨桔梗皂苷D的治疗效果,并测定了神经功能缺损评分、脑梗死面积、学习记忆能力、铁死亡通路蛋白的表达。我们的发现为桔梗皂苷D在脑缺血再灌注损伤中的潜在应用提供了线索。

    1 材料与方法

    1.1 仪器与试剂 研磨机、立体显微镜(南京江南永新光学有限公司,SZ6100)、水迷宫(上海新软信息技术有限公司)、SDS-PAGE电泳设备(Bio-Rad,Mini Protean 3)、湿转移膜仪器(Bio-Rad,170-3930)、脱色摇床(金坛医疗仪器,电化学发光成像系统(Tanon,180-5001)、BCA蛋白检测试剂盒(Beyotime,P0010)、桔梗皂苷D(瑞芬思生物科技有限公司;纯度≥99%)、抗MAP2/GPX4/FTH1/TfR1抗体(Abcam),以及HRP抗兔抗体(Beyotime,A0208)。

    1.2 分组和动物管理 60只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(年龄8周;体重220～250 g)购自上海Alac实验动物有限公司(中国上海);许可证号:SCXK(上海)2020-09。所有实验均按照《实验动物饲养管理和使用指南》(美国国家研究委员会)进行,并经本单位实验动物使用伦理委员会批准 ......