颜微微 邓可斌

    耳鸣是一种听觉幻觉,是一种在没有声音刺激的情况下感知声音的现象,其被认为源于耳蜗和中枢神经系统,出现的原因可能与失眠、焦虑、抑郁、认知功能障碍和压力等衰弱状况有关[1]。目前还没有能够治疗耳鸣的医学设备,仅可以通过药物、膳食补充剂或者助听器来缓解,但治疗效果并不显著[2]。因此,研究耳鸣的潜在发病机制对开发新的治疗方法至关重要。SIN3A是SIN3/组蛋白脱乙酰酶(HDAC)转录抑制复合物的中心支架蛋白,有研究发现SIN3A缺失会增加突触支架Homer1的表达,改变代谢型谷氨酸受体5(metabotropic glutamate receptor 5,mGluR5)对海马体长期记忆增强的依赖性[3,4]。Homer1是一种突触后支架蛋白,位于突触后密度区,其在情绪障碍和抗抑郁治疗中起着重要作用,有研究已经证明了Homer1在耳鸣小鼠的听觉皮层中被上调,而mGluR5抑制剂可以通过抑制Homer1表达而对耳鸣具有抑制作用[5,6]。东莨菪碱(Scopolamine,SPL)是一种莨菪烷型生物碱,它存在于茄科植物中,可用作中枢神经系统抑制剂,用于诱导神经系统损伤[7]。已有研究发现,SPL诱导的失忆症与SIN3A的上调表达有关,而SIN3A的失调与包括Homer1在内的神经元即刻早期基因的表达相关[8]。已知SPL可以选择性地增强大鼠嗅觉皮层中气味表征的泛化,但对大鼠听觉影响的研究还较少。因此,本研究通过水杨酸诱导大鼠耳鸣来探讨SPL是如何调节SIN3A表达对耳鸣大鼠的mGluR5/Homer1信号通路产生影响。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 大鼠:SPF级SD大鼠50只,8周龄180～220 g,购自于常州卡文斯实验动物有限公司,许可证号:SCXK(苏)2021-0013。

    1.1.2 主要试剂:氢溴酸东莨菪碱片(广州白云山光华制药股份有限公司,国药准字H44020373);卡马西平片(常州康普药业有限公司,国药准字H32021277);Trizol试剂(货号:R401-01,南京诺唯赞生物科技股份有限公司);反转录试剂盒、qPCR试剂盒(货号:RR036A、RR820L,北京宝日医生物技术有限公司);SIN3A、mGluR5、Homer1抗体(货号:ab307197、ab76316、ab184955,英国abcam公司);山羊抗兔IgG(货号:E-AB-1103,武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司) ......