李娜 沈江立 柳越冬 吴宪树 王磊 盛天骄 姚红娟

    溃疡性结肠炎(UC)好发于欧美国家,然而相关统计资料显示,近年来我国发病人数也在持续增加[1]。 现阶段,药物是治疗UC的主要方式,临床应用最广泛且效果较好的是氨基水杨酸类、糖皮质激素类等药物。相关研究结果表明,此类药物具有非特异性的抗炎效果,近期治疗效果尚可,但不良反应较多[1]。优化溃结方是柳越冬教授临床对 UC 脾虚湿热证型的临床验方,健脾益气,祛除湿热标本兼治临床应用长达 20 余年,临床疗效显著[2-5]。动物实验证实,该复方可以改善 UC 模型大鼠的疾病症状,调节细胞外信号调节激酶(extracellular-signal regulated protein kinase,ERK)、白细胞介素-1β 等表达水平,改善肠道炎症[3]。网络药理学分析技术揭示优化溃结方可调控肠道免疫应答涉及白介素-17 免疫信号通路、Toll 样受体信号通路[4]。优化溃结方内含小分子化合物大豆苷元、槲皮素。单体大豆苷元可调节 IL-6 水平,抑制 p65-NF-KB、p-IKB-a、p-IKK,缓解肠道黏膜炎症,槲皮素能够改善肠道菌群紊乱,恢复肠道屏障结构与功能[6]。本研究分析气滞血瘀模型UC大鼠的肠道菌群、结肠炎疾病活动指数(DAI),从肠道菌群角度探讨该疗法的治病机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 SPF级雄性SD大鼠,体重200～240 g,由西安交通大学医学实验动物中心提供,合格证号2018-001,室温(20±2)℃,相对湿度50%～60%。实验动物词养及观察在咸阳市中心医院实验中心进行,实验方案经咸阳市中心医院伦理委员会审批。

    1.2 UC(气滞血瘀型)动物模型建立 制备模型方法参考TNBS/乙醇二次致炎法结合束缚法[2]。模造模方法:SD大鼠适应性饲养1星期,限制大鼠四肢活动度(约8 h/d),后给予TNBS /乙醇溶液灌注结肠,造模前,禁食不禁水24 h,称重后用3 ml/kg戊巴比妥钠麻醉,将灌胃针从肛门插至距肛门8 cm处,60 mg/kg TNBS溶液缓慢灌肠,诱导急性结肠炎。15 d后(首次造模第16天)再次采用同样的方法给予30 mg/kg TNBS溶液灌肠,造成复发性结肠炎。2次灌肠后均注入0.5 ml空气,倒立数分钟,取仰卧位放回饲养笼,正常喂养。正常组按上述方法对动物实施0.9%氯化钠溶液灌肠。

    1.3 药品制备 优化溃结方组成:黄芪20 g、炒白术15 g、苍术10 g、青黛3 g、败酱草20 g、白头翁15 g、红花10 g,以上药物均购自于咸阳市中心医院中药房,以上复方总用量为93 g,加水浸泡45 min,文火煎煮40 min后滤取药液,药渣加同体积水继续煎煮30 min,2次所得滤液合并并浓缩定容至93 ml ......