黄超 方兴刚 陈璐

    脑胶质瘤是中枢神经系统颅内原发性恶性肿瘤,据世界卫生部门统计,2020年全球肿瘤患者增加达20多万人[1]。婴儿至老年人都有发病患者,年龄越大恶性程度越大,在颅内呈浸润性生长[2]。常规治疗手段为手术治疗再辅以放疗和化疗,生存期较短[3]。铁死亡是一种铁依赖的脂质过氧化物过度积累介导的细胞死亡形式,研究发现,铁死亡也可以杀死肿瘤细胞[4]。因此,探究铁死亡对治疗肿瘤具有重大意义。苍术素是茅苍术挥发油的主要成分,现代医学研究表明苍术素具有抗菌、抗肿瘤等作用[5]。邵晨等[6]研究表明苍术素可以抑制细胞因子分泌和阻断细胞周期,从而抑制人结直肠癌LS1747T细胞增殖。He等[7]研究表明苍术素可以抑制肝癌Huh7和HCCM细胞增殖、迁移,促进细胞凋亡和细胞周期停滞。大量研究表明Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路与铁死亡密切相关。谌程程等[8]研究表明鸦胆子苦醇可以下调Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路从而促进铁死亡,诱导皮肤磷癌cSCC细胞凋亡,并抑制其增殖。芮玲等[9]研究表明银杏素可以通过抑制Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路,进而抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导其铁死亡。所以推测Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路在铁死亡过程中发挥重要作用。因此,本研究就苍术素调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路对脑胶质瘤细胞铁死亡的影响进行探究,为临床用药提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 实验细胞与动物 U251细胞购自于深圳市豪地华拓生物科技有限公司。选取雄性SPF级裸鼠30只(20.0±2.0 g),购自厦门大学,合格证号：SCXK(闽)2018-0003,适应性饲养1周,取食和饮水不限制,喂养温度(22.0±2.0)℃,相对湿度(60±5)%,光照为12 h光-暗循环(AM 7∶00～PM 7∶00)。

    1.2 试剂 苍术素购自上海赢瑞生物医药科技有限公司;Nrf2抑制剂-ML385购自北京百奥创新科技有限公司;胰蛋白酶购自无锡云萃生物科技有限公司;胎牛血清购自深圳振强生物技术有限公司;RPMI 1640培养基购自广州塞库生物技术有限公司;MTT、Edu试剂盒购自江西江蓝纯生物试剂有限公司;Fe2+、MDA、LDH、GSH、ROS试剂盒购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司;Ki-67、cleaved-caspase3、Nrf2、SLC7A11、GPX4一抗及二抗均购自美国Abcam公司 ......