李艳蓉 邹余粮

    妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)会导致胎盘异常,严重者会导致妊娠受损以及新生儿出生缺陷[1]。而近几年GDM的发病率逐渐升高,也大幅增加了儿童在生命早期患肥胖、代谢综合征等疾病的几率[2-3]。研究显示,苦参的干燥根用于痢疾和湿疹等,在临床上应用广泛[4]。苦参中的主要活性成分就是苦参碱(C15H24N2O),具有治疗癌症、抗炎、抗糖尿病、改善心血管疾病等双重药理活性[5-6]。此外,Notch信号通路在胚胎和器官发育以及调控细胞生长方面具有重要作用,包括细胞增殖和凋亡;例如有研究显示Notch通路参与肝脏生长发育以及病理变化过程,可以抑制肝脏纤维化[7-8]。随后发现Notch信号通路诱导会导致细胞死亡并损伤组织,而且Notch通路被证明对糖尿病造成的肾损伤有关,通过抑制Notch通路可以有效缓解[9]。而笔者发现对于苦参碱能否通过调控Notch信号通路对高糖诱导的人滋养层细胞的增殖和凋亡产生的影响研究较少。本文探究苦参碱对高糖诱导的人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo的增殖和凋亡的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验细胞 人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo来自上海雅吉生物科技有限公司。

    1.2 主要试剂 苦参碱来自成都普思生物科技股份有限公司;RPMI-1640细胞培养液购自上海浩洋生物科技有限公司;细胞计数试剂盒购自北京奥秘佳得医药科技有限公司;凋亡试剂盒、兔源一抗Notch1、PCNA、β-Tubulin购自爱必信(上海)生物科技有限公司;胎牛血清购自成都化夏化学试剂有限公司;Notch通路激活剂Jagged1购自上海研卉生物科技有限公司;超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)试剂盒购自上海一研生物科技有限公司;丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒购自上海研卉生物科技有限公司;二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白浓度测定试剂盒来自上海康朗生物科技有限公司;兔源一抗BAX、Bcl-2购自上海钰博生物科技有限公司;辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔二抗购自上海莼试生物技术有限公司 ......