饶重贤 胡姗姗 谭伟 王军民 金胜昔 周游

    颅内动脉瘤(intracranial aneurysm,IA)是发生在颅内动脉壁上的一种疾病,使动脉发生永久性扩张。如果IA破裂会导致很高的死亡率发生。临床上主要采用手术来进行预防及治疗,严重缺乏有效的药物对IA进行治疗[1-2]。IA的发病机制包括血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的过度凋亡、血管内膜增生等,其中VSMCs的增殖和凋亡与IA有密切关联[3]。因此,本文对IA相关的小鼠主动脉血管平滑肌细胞(aortic vascular smovoth muscle cells,MOVAS)的药物作用机制进行研究,促进人类对于IA的有效治疗。吴茱萸碱来自于中药吴茱萸,经过现代药理学研究发现,其具有镇痛、抗炎、抗肿瘤作用外,还可以保护心脑血管[4-5]。基质细胞衍生因子1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)是一种趋化因子,参与细胞的增殖和凋亡,应激诱导后表达增多。CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)则是一种G蛋白偶联受体,是SDF-1α的受体,同样在多种细胞中表达[6]。有研究发现,SDF-1α/CXCR4通路也参与血管的生成和延伸[7]。而笔者发现对于吴茱萸碱能否通过调控SDF-1α/CXCR4信号通路对IA VSMCs的增殖和凋亡产生影响研究的还比较少。因此,本研究旨在探究吴茱萸碱与SDF-1α/CXCR4信号通路对IA VSMCs的影响以及其相互作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验细胞及动物 (1)小鼠主动脉血管平滑肌细胞(MOVAS)来自杭州杰西摩生物科技有限公司。(2)24只雄性BALB/c小鼠,体重为18～22 g,购自湖北贝恩特生物科技有限公司,生产许可证号为SCXK(鄂)2021-0027,该研究已得到本院动物伦理委员会的批准。

    1.2 主要试剂 平滑肌22α(SM22α)抗体来自上海煊翎生物科技有限公司;平滑肌α肌动蛋白(α-SMA)抗体来自武汉华美生物工程有限公司;吴茱萸碱来自湖北惠择普医药科技有限公司;MTT来自上海易恩化学技术有限公司;DMEM细胞培养液购自上海和序生物科技有限公司;细胞计数试剂盒购自厦门研科生物技术有限公司;凋亡试剂盒购自武汉艾美捷科技有限公司;胎牛血清购自上海跃腾生物技术有限公司;CTCE-0214购自上海鸿肽生物科技有限公司;兔源一抗SDF-1α、GAPDH购自上海鸿肽生物科技有限公司;兔源一抗BAX、CXCR4来自普健生物(武汉)科技有限公司;兔源一抗PCNA购自上海泽叶生物科技有限公司;辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔二抗购自镇江厚普生物科技有限公司 ......