潘巧虹 周影 颜卫文 李莉 孙雯 陶桂兰 肖欢

    甲状腺癌是临床常见的一种恶性肿瘤,银杏叶等天然植物的提取物具有清除氧自由基与抗甲状腺癌等作用,其作用途径主要涉及多个基因或信号通路[1-4]。白头翁皂苷 D 属于毛茛科植物白头翁的主要活性成分,其具有抗肿瘤作用,并可抑制乳腺癌细胞增殖[5]。但白头翁皂苷 D 与甲状腺癌的相关研究相对较少。环状 RNA(circular RNA,circRNA)是一类闭合的非编码RNA分子并可能参与多种疾病发生发展过程。研究显示,circ_0001178 在结直肠癌中表达上调,并可充当多个 miRNA 的海绵分子而促进结直肠癌细胞迁移及侵袭[6]。生物信息学预测显示circ_0001178 与 miR-885-5p 存在结合位点,研究表明 miR-885-5p 在甲状腺癌中表达水平降低,circ_0004458 可通过抑制 miR-885-5p 表达而促进甲状腺癌的发展[7]。但circ_0001178/miR-885-5p 是否参与甲状腺癌形成及发展过程,是否可作为白头翁皂苷 D 治疗甲状腺癌的潜在靶点尚未可知。因此,本研究主要探讨白头翁皂苷 D 是否可通过调控 circ_0001178/miR-885-5p 分子轴而影响甲状腺癌细胞的恶性生物学行为。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂 白头翁皂苷 D(纯度≥98%)购自南京春秋生物工程有限公司;人甲状腺癌细胞 SW579 购自上海通蔚生物;DMEM 培养液与胎牛血清购自美国 Gibco;Trizol 试剂购自北京全式金生物;逆转录试剂与荧光定量 PCR 试剂购自北京天根生化;Lipofectamine2000、MTT、Transwell 小室、Matrigel 基质胶购自北京索莱宝;si-NC、si-circ_0001178、miR-NC、miR-885-5p mimics、anti-miR-885-5p 购自广州锐博生物;pcDNA3.1 与pcDNA-circ_0001178 购自美国Invitrogen;兔抗人 E-cadherin、N-cadherin 抗体与 HRP 标记的山羊抗兔 IgG 二抗购自美国 Santa Cruz ......