ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测１０６例脑梗死凝血因子ⅩⅢ Ｖａｌ３４Ｌｅｕ基因多态性结果分析
(3)限制性内切酶分析产物经EZ Spin column PCR Product Purification Kit纯化，取纯化的产物10 μl，用限制性内切酶Hin 6 I10U,37℃消化过夜，反应体积20 μl，取5 μl消化后产物在30 g/L的琼脂糖凝胶上电泳，溴乙锭染色，紫外灯下观察结果。(4)基因型鉴定PCR扩增产物114 bp片段中存在一个Hin6酶切位点，可将片段切成94 bp、20 bp两个片段，当FⅩⅢa亚单位2号外显子上的34号密码子发生GT突变，导致其编码的缬氨酸被亮氨酸替代时，则消除了Hin6酶切点，因此，根据琼脂糖凝胶电泳所见区带的位置，以PUC19DNA/MspI/Maker作为标准分子量，从而鉴定基因型为突变纯合子或Val34Leu杂合子或Val34野生型。
3.统计学处理
采用SPSS10.0 for windows统计软件对组间基因型频率的差异进行χ2检验。
结果
1.基因型电泳图谱PCR产物经Hin6I酶切后琼脂糖凝胶电泳只可见94 bp一条区带 ......
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