老年医院肺炎克雷伯菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析
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参见附件(909KB，2页)。
【摘要】 目的 探讨老年医院患者感染肺炎克雷伯菌产质粒介导的AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的状况及其耐药性,为临床合理用药提供参考。
方法 用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验法检测AmpC酶,药敏试验采用KB纸片法,依据NCCLS2006判断标准分析结果。结果182株肺炎克雷伯菌中检出产酶菌株117株,检出率为64.3%,其中单产ESBLs63株,单产AmpC酶32株,一并产ESBLs和AmpC酶22株,检出率分别为34.6%、17.6%和12.1%。产AmpC酶肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素高度耐药,耐药率达74%～100%;头孢吡肟耐药率为43.2%、头孢哌酮/舒巴坦耐药率为29.9%,而阿米卡星、左氧氟沙星的耐药率仅为16.4%、10.1%;对亚胺培南、美罗培南均100%敏感。产ESBLs菌株除对亚胺培南、美罗培南100%敏感,阿米卡星、左氧氟沙星耐药率分别为30.7%、28.8%外,其他头孢菌素、酶抑制剂的抗菌药物均表现较高耐药性。结论 老年医院患者感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的状况相当突出,产酶株对多种抗菌药物耐药,对碳青霉烯类敏感性最好。
【关键词】 AmpC酶;ESBLs;肺炎克雷伯菌;耐药性;老年人
文章编号:1003-1383(2010)05-0560-02 中图分类号:R 378文献标识码:A
doi:10.3969/j.issn.1003-1383.2010.05.021
随着广谱抗生素的广泛应用,临床耐药菌株的产生相当突出和严重。肺炎克雷伯菌是临床分离及医院感染最重要的病原菌之一,而由该菌引起的感染难治性日益突现,尤其在老年病医院。肺炎克雷伯菌作为医院感染的重要致病菌,继超广谱β内酰胺酶(ESBLs)后,又出现质粒介导的AmpC酶,且质粒介导者因其具有较快的传播速度和较强的耐药性,日益受到人们的重视[1]。实验室注重产AmpC酶及ESBLs菌株的检测,对于指导临床合理应用抗生素,减少耐药菌株的产生及传播具有非常重要的意义。为此,本文对我院(老年病医院)老年患者感染肺炎克雷伯菌AmpC酶和ESBLs的产生情况及其耐药性进行分析,现报道如下。
材料与方法
1.材料 ①菌株:为我院2009年3月至2010年3月住院患者临床标本分离的肺炎克雷伯菌,共182株,患者年龄60～92岁,平均(67±3)岁。②药敏纸片及培养基均为英国OXOID产品。质控菌株:肺炎克雷伯菌ATCC603作为ESBLs检测的阳性对照株, 肺炎克雷伯菌T015作为AmpC酶检测阳性对照株。大肠埃希菌ATCC25922作为药敏质控株。均由卫生部临床检验中心提供。
2.病原菌的分离培养、鉴定及药敏试验细菌的分离培养按照《全国临床检验操作规程》(第三版)[2]进行,采用法国梅里埃公司ATB Expression自动细菌鉴定仪(配套相应的鉴定板)进行鉴定。药敏试验采用KB纸片法,根据NCCLS2006年版标准判定结果。
3.AmpC酶的检测 初筛试验:在KB纸片扩散法药物敏感性试验中,如果头孢西丁抑菌圈直径≤17 mm,提示该菌株为疑产AmpC酶菌株。确证试验:应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶[3]。
4.ESBLs 的检测按照NCCLS 推荐的标准纸片扩散
法,头孢他啶/克拉维酸与头孢他啶抑菌圈直径相比≥5 mm,和(或)头孢噻肟/克拉维酸与头孢噻肟抑菌圈直径相比≥5 mm,可确证为产ESBLs菌株。
结果
1.ESBLs和AmpC酶检出结果 182株肺炎克雷伯菌中检出产酶菌株117株,检出率为64.3%,其中单产ESBLs63株,单产AmpC酶32株,同时产ESBLs和AmpC酶22株,检出率分别为34.6%、17.6%和12.1%。
2.对常见抗生素的耐药情况 产AmpC酶肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素高度耐药,耐药率达74%～100%;头孢吡肟为43.2%、头孢哌酮/舒巴坦为29.9%。而阿米卡星、左氧氟沙星的耐药率仅为16.4%、10.1%;对亚胺培南、美罗培南均100%敏感。产ESBLs菌株除对亚胺培南、美罗培南100%敏感,阿米卡星、左氧氟沙星耐药率分别为30.7%、28.8%外,其他头孢菌素、酶抑制剂的抗菌药物均表现较高耐药性。见表1。
讨论
本文对我院老年患者感染的182株肺炎克雷伯菌产质粒型AmpC酶及ESBLs进行检测,共检出产酶菌株117株,检出率为64.3%,其中单产ESBLs63株,单产AmpC酶32株,一并产ESBLs和AmpC酶22株,检出率分别为34.6%、17.6%和12.1%,均比国内的文献报道高[1,4]。这可能与我院患者年龄偏高、免疫功能低下、病种特殊、住院周期长和过多使用广谱抗生素等有关。
本文表1结果凸显:产AmpC酶肺炎克雷伯菌对大部分抗生素耐药情况十分惊人。其中,对第三代头孢菌素表现出高度耐药,耐药率高达74%～100%;头孢吡肟为43.2%、头孢哌酮/舒巴坦为29.9%。而阿米卡星、左氧氟沙星的耐药率仅为16.4%、10.1%。但所有产AmpC酶菌株对亚胺培南、美罗培南仍然100%敏感。因此,对于产AmpC酶肺炎克雷伯菌引起的感染,临床不应使用第三或四代头孢菌素及酶抑制剂,可选用碳青霉烯类药物进行治疗。而产ESBLs肺炎克雷伯菌对酶抑制剂哌拉西林/他巴唑、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为49.1%、41.8%,这与胡军的产ESBLs株对β内酰胺酶抑制剂与抗生素复合制剂敏感率较高,如对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦敏感率多在70%以上的报道[1]存在差异。这可能与不同地区和不同医院产ESBLs菌株的流行耐药基因型有一定的差异有关 ......
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