iNOS及VEGF在兔角膜碱烧伤后角膜新生血管生成中的作用研究(2)
1材料与方法1.1材料实验应用试剂：兔抗iNOS单克隆抗体，兔抗VEGF单克隆抗体，DAB显色试剂盒(购于武汉博士德生物公司)；二步法免疫组化试剂盒(购于北京中山生物技术有限公司)；As2O3(哈尔滨医科大学第一临床医学院医院提供)。实验动物：大白兔(哈尔滨医科大学第一临床医学院提供)。48只实验兔随机分为0.1 ml组、0.3 ml组和0.5 ml组三个实验组和一个对照组，每组12只，实验组结膜下分别注射1 g/L的三氧化二砷0.1 ml，0.3 ml，0.5 ml，对照组0.3 ml生理盐水结膜下注射；每周两次。1.2动物模型制备结膜囊滴倍诺喜表面麻醉，氯胺酮(25 mg每千克体重)肌肉注射麻醉；7 mm直径滤纸片浸入1 mol/L的氢氧化钠溶液中30秒，取出置于兔角膜中央2分钟后拿开滤纸，用生理盐水冲洗；适量红霉素眼膏及阿托品眼膏涂于结膜囊内。碱烧伤后每日在裂隙灯下观察兔角膜，每次测量角膜新生血管的长度和数量，并记录。应用Robert电脑数学模型公式：A=C/12×3.1416[r2(rL)2](A代表新生血管面积 ......
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