黄 虎，杨志波，万江波，陶 侃，郭莉莉，秦紫嫣，何彰华，刘 兴

    (1.上海上美化妆品股份有限公司全球研发中心，上海 200065；2.湖南中医药大学第二附属医院皮肤科，湖南 长沙 410005；3.昆药集团股份有限公司，云南 昆明 650106；4.湖南讴睿生物科技有限公司，湖南 长沙 410205)

    皮肤是机体抵御外界有害刺激的保护屏障。长时间暴露在紫外线(UV)下对皮肤屏障的结构和功能存在直接损害作用，可诱发皮肤过早的光老化、色素沉着、炎性反应和癌变[1]。因此，需寻找一种天然的皮肤保护化合物以避免UV对皮肤带来的损伤。青蒿是中医治疗中常用的中草药[2]，研究发现[3]，青蒿以及其有效成分可通过调控T淋巴细胞功能以及IL-10、TNF-α治疗光敏感性皮肤病、系统性红斑狼疮、湿疹等疾病，还可通过抑制皮肤癣菌、痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌及糠秕孢子菌等治疗感染性皮肤疾病。青蒿油(artemisia naphta oil，AN)作为在青蒿素中提取的活性成分，在治疗皮肤病方面也存在巨大潜力。基于此，本研究拟探讨AN对UV诱导的皮肤屏障损伤模型小鼠的干预作用及对皮肤微生物的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 8周龄SPF级BALB/c雌性小鼠(湖南斯莱克景达实验动物有限公司)80只。本研究通过湖南中医药大学第二附属医院动物伦理委员会批准，所有小鼠饲养温度为20 ℃～26 ℃，相对湿度为40%～70%，自由摄食、饮水，严格遵循国家动物饲养规则饲养1周后进行实验。

    1.2 试剂与仪器 无菌无酶水(北京索莱宝生物科技有限公司)，吐温20、无水乙醇(国药集团化学试剂有限公司)，AN(上海上美化妆品股份有限公司)；皮肤测试仪(德国CK公司，型号：Derma-Expert MC760)。

    1.3 AN的提取与配制 共同加热青蒿叶与石油醚后过滤出含AN的溶液，蒸发去除过滤液中的石油醚，100 ℃～110 ℃下蒸馏得到AN粗产物；将AN粗产物放入精炼罐中110 ℃加热30 min后冷却；加入硅胶，搅拌30 min后过滤脱色。配制0.5%、1.0%、1.5%、3.0%、5.0%AN(换算成人体使用浓度分别为0.055%、0.11%、0.16%、0.30%和0.55%)：分别将50 μl、100 μl、150 μl、300 μl、500 μl AN加入至400 μl吐温20中 ......