黄志昂 尚 艳 刘方方 赛亚飞 路武杰 冯志军

    慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种以气流受限为主要特征的慢性呼吸系统疾病，其病情常呈进行性进展，患病率及病死率较高，严重危害患者身体健康，已成为一个重要的公共卫生问题[1]。COPD主要累及肺脏，病因较为复杂，炎症反应被认为是其主要发病机制，但目前尚未找到有效治疗方案[2]。干细胞是一类能特异性分化成各种组织器官的细胞，目前临床上以被应用于多种疾病的治疗中，其中脂肪间充质干细胞(amniotic-derivedmesenchymalstem cells，ADMSCs)因具有强大自我更新能力及分化潜能，业已成为再生医学及组织工程学应用较多的理想种子细胞[3]。研究证明，干细胞移植对多种肺损伤均有较好的修复作用[4，5]，但 ADMSCs治疗肺疾病方面的研究较少。本研究采用熏香烟加气管注入内毒素诱导的COPD大鼠模型为实验对象，将培养ADMSCs移植到模型鼠肺脏组织内，观察外源性的ADMSCs对模型鼠肺脏组织的病理和生化指标的影响，藉以探究 ADMSCs在COPD治疗中的价值，为临床治疗COPD另辟思路。现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1COPD模型的制备与分组 取健康SPF级雄性SD大鼠60只，体重(220±20)g(由上海斯莱克实验动物有限公司提供)，将其随机分对照组、治疗组及模型组，治疗组和模型组大鼠进行COPD模型的制备，对照组不进行造模。取40只SPF大鼠，给予生理盐水 10 ml/(kg·d)灌胃 4周后开始建模，于建模第 1、14 d经气管注入2 g/2l内毒素(Sigma)200μl，第2～30 d(第14 d除外)将大鼠置入有机玻璃仓内，注入过滤嘴香烟烟雾，0.5 h/d，每天以生理盐水灌胃，以大鼠出现频繁咳嗽症状作为判断造模成功的标准。

    1.2ADMSCs的分离、培养 另取健康SPF级雄性SD大鼠2只，颈椎脱臼法处死，分离附睾及腹股沟处脂肪组织，PBS冲洗后剪碎，取少量置于离心管内，加入胶原酶混匀，于37℃消化2 h，加入低糖DMEM培养基，混匀后离心10 min，弃上清液 ......