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编号:1961441
miR-222-3p对口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖、凋亡和侵袭的影响
http://www.100md.com 2023年10月28日 医学新知 2023年第5期
细胞系,靶点,组间,1材料与方法,1细胞及主要试剂,2细胞培养及转染,3实时荧光定量PCR(qRT-PCR),4MTT法检测细胞增殖能力,5流式细胞术检测细胞凋亡,6Transwell
     杨淑银,岳二丽,郭留云,陆 珂,杨梦宇

    郑州大学第一附属医院牙周科(郑州 450000)

    口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是口腔颌面部常见的恶性肿瘤之一,易发生头部或颈部淋巴结转移,严重影响患者预后和生存[1-2]。因此探讨OSCC发生发展的分子机制对寻找OSCC治疗靶点以及改善OSCC患者预后具有重要意义。微小RNA(miRNA,miR)是一类内源性单链非编码小分子RNA,可通过调节其下游靶基因的表达参与细胞增殖、分化和凋亡等多种生物学过程,与多种肿瘤的发生发展、预后密切相关[3-4]。近年研究显示,miR-222-3p在宫颈癌[5]、非小细胞肺癌[6]及甲状腺癌[7]等多种恶性肿瘤组织中异常表达,并与患者预后密切相关。已有证据显示,miR-222-3p在OSCC患者外周血中高表达,且与TNM分期和淋巴结转移及生存期密切相关。但miR-222-3p在OSCC中的作用机制尚未明确,本研究通过分析miR-222-3p对人OSCC CAL-27细胞增殖、凋亡及侵袭的影响,初步探讨其对OSCC生物学行为的影响,为OSCC的治疗提供新的思路。

    1 材料与方法

    1.1 细胞及主要试剂

    人OSCC CAL-27细胞株及人正常口腔角质细胞株(hNOK)均购自北京北纳创联生物技术研究院。RPMI-1640培养基、胎牛血清、0.25%胰蛋白酶、Trizol试剂、脂质体lipofectamine 2000购自美国Invitrogen公司;反转录试剂盒和SYBR Green荧光定量试剂盒购自日本TaKaRa公司;甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)试剂盒(M-0283)购自美国Sigma公司;BAX(ab32503)、Bcl-2(ab32124)、MMP-2(ab92536)、N-cadherin(ab76011)、E-cadherin(ab40772)及β-actin(ab8226)抗体购自英国Abcam公司 ......

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