王 磊

    (江西卫生职业学院，江西南昌，330052)

    RUNX3(human runt—related transcription factor 3)基因是近来研究较多的一个肿瘤抑制基因，该基因是位于染色体lp36，全长67kb，内有启动子p1、p2两个、外显子6个和开放阅读框1290bp[1]。在这2个启动子中富含有GC，特别是在p2启动子中GC的含量为64%，容易出现甲基化改变[2]。对于基因的甲基化和去甲基化现象，这是细胞生长和分化的重要程序，可是在肿瘤的发生发展中则会发生紊乱。研究中，通过在使用不同浓度的去甲基化药物5-Aza-CdR对膀胱癌5637细胞株处理后，检测RUNX3基因的甲基化情况、表达变化、对细胞增殖及凋亡的影响，进而可能为膀胱癌的早期诊断与检测、治疗以及预后提供依据，寻找新的治疗靶点。

    1、实验材料

    膀胱癌细胞株5627细胞。

    2、实验方法

    2.1 细胞培养、分组 将处于对数生长期的5637细胞株接种到细胞培养板，分为 A、B、C、D4个组别。

    2.2 加入不同浓度5-Aza-CdR培养 4组分别加入未加药的细胞株作为对照组(A组)、加入低浓度(1umol/l)(B组)、中浓度(16umol/l)(C 组)、高浓度(64umol/l)(D 组)的 5-Aza-CdR，继续培养，收集上述几组实验组细胞待测。

    2.3 流式细胞仪 检测各个组别的细胞凋亡情况 ......