用分型方法检测溯源副溶血性弧菌(2)
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2.2 PFGE分型 878株VP，经制胶、酶切、电泳后菌株的DNA片段得到良好分离，分为15-20个条带，各片段分子量在20-700kb之间。用丹麦Bionumerics4.6版软件进行聚类分析，377株海产品分为25个PFGE型，见图1；501株病人和食物中毒VP分为19个PFGE型，见图2，其中1型296株最多。经SPSS软件统计数据，作变量F分析处理，1型与其他PFGE型有统计学意义差异(P<0.05)。
2.3 ERIC-PCR分型 261株VP中141株来自海产品、水等，60株来自腹泻病人，60株来自多起食物中毒，其中病人粪便或肛拭50株、食品10株。食品和环境VP的ERIC-PCR多态性电泳条带，见图3；病人VP的ERIC-PCR多态性电泳条带，见图4。经聚类分析，分出42个ERIC基因型，见图5，18型最多。
3 讨 论
VP是一种通过污染/携带食品传播疾病的病原菌，因此，时关食品安全，被政府和公众关注。溯源是分析病原菌亲缘关系和追踪来源一种有效手段，通过发现流行优势型，为追踪传染源和疾病的防控提供依据，是疾病诊断的重在手段。传统的方法有生物分型(Biotype)、噬菌体分型(Phage typing)、血清分型(Serotyping)和蛋白图谱(PAGE)等，质粒图谱分析法(Plasmid analysis)和分子分型方法有制性片断多态性分析(RFLP)、扩增片断长度多态性分析(AFLP)、脉冲场凝胶电泳分析法(PFGE)、rDNA指纹图法(Ribotyping)、随机引物PCR法(RAPD)、多位点序列分析(MLST)、核酸序列分析法(16S rDNA and DNA sequencing)等。本文选择血清分型、PFGE和ERIC-PCR等3种常用方法进行比较，分析其实用性。
VP菌株的血清型与引起急性胃肠炎等疾病的暴发和散发有关联。根据VP的O和K抗原不同，可分成众多的血清型、群。始于1996年的印度的加尔各答的O3血清群是当前最主要的VP致病菌株[8]在上世纪代末已成为全球大流行的优势株[9]并一直保持到今，其高感染率和蔓延能力已引起各国的高度关注。在国内的研究也证实O3：K6型VP也是导致我国VP感染的优势株。我们从480病人分离株分出6个血清群，其中72.71%(349/480)的菌株是O3血清群，因此认为该血清群是腹泻病人的流行优势株，与文献报道一致。海产品VP分出10个血清群，与病人VP相比血清群较分散，其优势株为O6和O5血清群，与病人的流行优势株(O3血清群)不同，由此可见，海产品分离株VP的优势株与病人分离株中的优势株存在有差别 ......
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