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编号:13685206
人外周血内皮组细胞的培养与鉴定
http://www.100md.com 2014年5月1日 《中国保健营养·下旬刊》 20145
单个核细胞,内皮祖细胞,细胞形态学,细胞表型
     【摘要】 从外周血中分离单个核细胞(MNCs),种植在纤维连接蛋白(Fn)包被的六孔板,以EGM-2培养基定向诱导培养。培养第4天,全量换液后可见梭形或多角形贴壁细胞,镜下可见多个呈“血岛”样生长的细胞集落,集落中间为聚集成簇的圆形细胞,周边环绕放射状梭形细胞。培养初始2周,梭形细胞首尾相连呈条索样生长或两排细胞平行排列呈管样生长,并可见条索样或管样排列的细胞相互交错成网。培养至第3周,细胞呈现为铺路石样外观;经传代后具有次级集落形成能力。流式细胞术显示内皮组细胞(EPCs)表面标志物CD34,KDR呈阳性,而单核、巨噬细胞系表面标志物CD14无表达。激光共聚焦显微镜下,EPCs具有摄取Dil-acLDL和结合FITC-UEA-1的能力。

    【关键词】 单个核细胞;内皮祖细胞;细胞形态学;细胞表型

    doi:10.3969/j.issn.1004-7484(x).2014.05.013 文章编号:1004-7484(2014)-05-2417-02

    1 材料与方法

    1.1 材料 淋巴细胞分离液购自天津灏洋,磷酸缓冲盐溶液(PBS)、胎牛血清(FBS)、青链霉素购自Hyclone,EGM-2购自Lonza,胰蛋白酶购自Amresco,人纤维连接蛋白(HFN)购自merck,DiI-acLDL购自Molecular probes,FITC-UEA-I、Galetin购自Sigma ......

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