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编号:13737834
人胚胎干细胞生物学特征及成骨诱导分化相关研究(2)
http://www.100md.com 2013年2月1日 胡健鹏
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    参见附件。

     3 结果

    3.1 hESC特征鉴定

    传代培养的hESC形态显示核大而明显,核质比高,有一个或多个核仁,能维持典型的未分化形态学特征,在体外培养时集落边界清晰可见;碱性磷酸酶活性呈强阳性;人早期胚胎阶段特异性抗原SSEA-3, SSEA-4表达阳性;未分化标记物OCT4呈阳性表达(图1A-E)。

    3.2 AFMSCs细胞周期测定

    流式细胞仪检测结果显示第4代hESC细胞G1,S和,G2期的细胞所占百分比分别为 86.20% 6.35% 和7.45%(图2)。

    3.3 染色体核型分析

    对体外培养的hESC进行染色体核型检测,为46,XX(图2)。

    3.3 成骨诱导分化实验

    hESC经成骨培养基诱导后,细胞形态发生明显改变。2w后做碱性磷酸酶染色,镜下观察,胞质中呈现灰黑色沉淀;3w后做细胞茜素红S染色,镜下可见细胞浆中出现大量深红色化合物,钙结节被染成红色(图4)。

    4 讨论

    人胚胎干细胞(hESCs),能够自我更新和多向分化的生物学特性, 能诱导分化为多个胚层的细胞具有重要的医学价值,在基因治疗、组织工程学、药学研究等许多领域都具有广泛的应用。利用培育的干细胞来实现组织再生和器官修复对于许多重大疾病如老年性痴呆、糖尿病、帕金森病、心脏疾病、神经损伤等的治疗具有重要意义 ......

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