【关键词】人肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP；XIAP相关因子1；细胞凋亡

    【中图分类号】R655 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2013)03-0038-02

    材料与方法

    一、材料

    人非小细胞肺癌A549细胞株属我院实验室保存，来源于中国科学院上海细胞生物学研究所；人非小细胞肺癌耐顺铂细胞株A549/DDP细胞株购自中南大学湘雅医学院细胞中心(北京大学肿瘤临床学院建系，其亲本细胞A549来源于ATCC)；DDP购自山东齐鲁制药有限公司(10mg/支，批号H20023460)；四甲基偶氮唑蓝(MTT)(Sigma公司)；Trizol试剂(Invitrogen 公司)；逆转录试剂盒(Fermentas公司)；特异性引物(上海生工生物工程技术服务有限公司)。

    二、方法

    1 细胞培养 人非小细胞肺癌A549细胞培养在DMEM(含10%小牛血清、100U/ml青霉素、100U/ml链霉素)培养液中，人非小细胞肺癌耐顺铂细胞株A549/DDP细胞培养在含有2mg/L DDP的DMEM培养基中，置37℃、饱和湿度、含5%C02和95%空气的恒温培养箱中培养，隔2-3天换液一次，定期传代，进行试验前1周更换为不含DDP的DMEM培养基以减少DDP对实验的干扰 ......