普通贴壁法分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)及其生物特性研究
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【摘 要】目的:建立从大鼠骨髓分离、培养间充质干细胞的标化流程,并探讨BMMSCs生物学特性。方法:无菌条件下剪取2~3周龄SD大鼠两侧完整股骨,采用D-PBS冲洗骨髓腔,含骨髓细胞的洗脱液经离心后收集细胞沉淀,用含10%FBS的LG-DMEM,于37?C、5% CO2、饱和湿度环境下进行BMMSCs原代培养,每2 d换液1次,同时洗脱未贴壁的血细胞;当BMMSCs生长汇合度达60%~70%时,按2~5×105/ml细胞密度进行传代培养。采用流式细胞术对第3代BMMSCs进行CD45、CD29和CD90表型分子检查。结果:分离纯化的BMMSCs具有典型MSCs特征,高表达CD90和CD29,不表达CD45;结论:表明普通贴壁法成功分离培养了具有间充质干细胞表型特征的大鼠BMMSCs
【关键词】间充质干细胞;大鼠
【中图分类号】R587.1 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2013)03-0044-02
引言
研究表明,骨髓含有造血干细胞(hemopoietic stem cells, HSCs)、内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)和间充质干细胞(mesenchymal stem cells ......
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