运用微滴式数字PCR技术鉴定潲水油的初步研究(2)
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参见附件。
食用植物油，包括采购自超市的20份样品以及某油脂公司提供的2份样品，采用实时荧光定量PCR法和QX-100微滴式数字PCR法两种检验方法，鸡特异性cytb基因、牛特异性cytb基因、羊特异性cytb基因、猪特异性线粒体基因和大米特异性GOS9基因的检测结果均为阴性。其中某油脂公司提供的大豆原油样品中的大豆特异性lectin基因检测结果为阳性。
2.2潲水油样本鸡特异性cytb基因检测结果
对经稀释的潲水油样本，利用预实验中灵敏度和检出率均较高的鸡特异性cytb基因进行检测。具体结果见表1。
2.3低含量潲水油样本多次重复检测结果
将低含量的潲水油样本1-5%，2-5%，3-5%进行多次重复检测。具体结果见表2-3。
3 讨论
表1的结果表明，在相同的稀释条件下，微滴式数字PCR的检出限明显低于实时荧光定量PCR。对于1-3号样本，实时荧光定量PCR的检出限分别为10%、20%、50%，而微滴式数字PCR的检出限分别为5%、10%、10%。
表2的结果表明，在多次重复检测的情况下，微滴式数字PCR可以检出低于正常检出限的样本，而实时荧光定量PCR无法做到。因为各自的判定原理不同：实时荧光定量PCR的阳性判定取决于Ct值，在样本浓度低的情况下，Ct值过大而且无法稳定检出，无法通过阳性判定标准；而微滴式数字PCR的判定为只要有阳性微滴即可判为检出，因此灵敏度更高 ......
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