SDS—PAGE方法分析暹罗鳄鱼肉差异蛋白
十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,特征谱带
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【摘 要】 目的：分析暹罗鳄鱼肉与鱼肉、鸡肉、猪肉中蛋白的差异，找出鳄鱼肉特异蛋白。方法：采用电泳缓冲液匀浆鳄鱼肉、鱼肉、鸡肉和猪肉，反复冻融5次后，得到4种动物肉匀浆液，采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法，对4种动物肉进行差异蛋白研究。结果：以13%的分离胶、60ug蛋白量上样，大板(16cm*20cm)进行SDS-PAGE，4种动物肉的电泳谱带有明显差异，鳄鱼肉存在特征条带。结论：鳄鱼肉中差异蛋白较多，此方法可以用于鉴别鳄鱼肉。
【关键词】暹罗鳄鱼肉；十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳；电泳；特征谱带
暹罗鳄(Siamese crocodile)隶属爬行纲、鳄鱼目、鳄科，具有繁殖能力强、生长快、抗病力强、皮质优良等优点。现代医学研究证明，鳄鱼肉含有丰富的优良蛋白质和人体必需的氨基酸、不饱和脂肪酸、维他命及各种微量元素[1]。鳄鱼肉不但味道鲜美，而且能补气血、壮筋骨、治哮喘、滋心养肺，对慢性咳嗽、糖尿病也有显著疗效。另外，由于鳄鱼肉含有高效抗体和奇特构造的血红蛋白，可以极快地提高人体免疫力和血液摄氧能力，改善机体缺氧症状[2-3]，因此，鳄鱼肉很可能具有医疗保健作用。但是鳄鱼肉是否含有不同于较廉价的常规食品肉类的特异的蛋白呢？如果作为保健品开发，如何进行质量控制呢？
本研究拟采用SDS-PAGE的方法，运用凝胶定量软件Quantity One，对鳄鱼肉和其他3种动物肉中蛋白差异条带进行电泳分析，从而找到鳄鱼肉与其他动物肉之间的差异特征条带，以作为鳄鱼肉及其他动物肉的鉴别依据，为鳄鱼肉保健品的开发研究奠定基础。
1 仪器与试剂
1.1 样品来源 暹罗鳄鱼肉由北京洪源澳达生物技术发展有限公司提供，鲫鱼肉、鸡胸肉、猪肉采购自花家地南街菜市场。
1.2 仪器 BS323S电子天平(德国赛多利斯股份公司)，移液器(Eppendorf公司)，I-13型台式高速冷冻离心机(Sigma公司)， UV-2100型紫外可见分光光度计(上海龙尼柯仪器有限公司) ......
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