益气活血化瘀法对肝癌前病变大鼠TGFβ—1、Smad4影响的实验研究
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【摘 要】目的：探讨益气活血化瘀法对大鼠肝癌前病变TGF-β1、Smad4的影响。方法：80只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组，用二乙基亚硝胺诱导肝癌的发生发展，以益气活血化瘀法对肝癌大鼠进行ELISA法TGF-β1、Smad4统一测定；另常规取材按电子和光学显微镜观察固定，并观察其病理组织学变化。结果：与模型组相比，中药高、低剂量组在4、12、20周时TGF-β1、Smad4明显上调。结论：TGF-β1、Smad4与肝癌的发生密切相关，益气活血化瘀法通过促进肝脏组织TGF-β1、Smad4的表达，从而对减缓大鼠肝癌的形成有一定作用，同时，益气活血化瘀法对肝癌前病变肝脏组织亦有明显改善作用。
【关键词】益气活血化瘀法；肝癌前病变；TGF-β1；Smad4
肝癌细胞的凋亡在肝癌发生发展过程中起重要作用，而TGF-β1、Smad4蛋白酶在肝癌凋亡信号传导中起重要的作用，研究表明TGF-β1、Smad4蛋白酶的激活与肝癌细胞凋亡有密切联系[1-2]。因此，在肝癌的预防及治疗工作中研究TGF-β1、Smad4是十分有必要的。我们综合前期的研究成果认为益气活血化瘀法对肝癌前病变细胞有显著的防治作用，为了探讨该法在肝癌细胞和肝癌相关疾病过程中的作用机理，我们应用二乙基亚硝胺(DEN)方法诱导大鼠肝癌细胞模型，进一步观察该法在肝癌促癌过程中对Smad4、TGF-β1的变化及影响。
1 材料与方法
1.1 药物：中药组成：黄芪、炒白术、丹参、川芎、当归、石见穿、地蟞虫，分别配制成含有生药浓度0.5g/ml 、1.0g/ml的两种中药制剂.
1.2 动物：清洁级雄性Wistar大鼠共80只，大鼠体重80克～100克，大鼠由长春高新医学动物研究中心提供.实验动物大随机分空白组、模型组、中药低剂量组和中药高剂量组4组。
1.3试剂与设备：TGF-β1、Smad4试剂盒购买于南京建成试剂有限责任公司；二乙基亚硝胺由Sigma公司生产；加样枪德国生产；德国离心机CR21型；日本MDF-V50V型超低温冰箱；玻璃匀浆器；分光光度仪 ......
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