HBV cccDNA检测方法及应用价值的研究进展(1)
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【文章编号】1004-7484(2014)05-2942-02
我国是肝炎大国，约有一亿三千万慢性乙肝携带者，由于慢性乙型肝炎是肝硬化和肝细胞癌的高危因素[1]，并且在我国每年约有30万人死于肝硬化和原发性肝癌[2]。因此对于乙型肝炎的诊断、治疗显得尤为重要，但是在治疗过程中存在着用药疗程、耐药、停药后复发等一系列问题导致肝炎久治不愈，主要原因之一是由于HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)的存在及消除困难。本文主要对HBV cccDNA检测方法及其在临床上应用价值进行阐述。
1 cccDNA的分子结构
HBV是嗜肝细胞病毒，当其感染进入肝细胞后，在细胞质脱衣壳并释放松弛环状DNA(rcDNA)， rcDNA是两条链均不闭合，负链较长的DNA分子，随病毒复制进行，rcDNA进入细胞核，利用宿主细胞胞核中DNA聚合酶、拓扑异构酶等形成HBV共价闭合环状脱氧核糖核酸(covalently closed circular DNA， cccDNA)，再以cccDNA为模板，在RNA聚合酶及逆转录酶的作用下合成前基因组RNA和mRNA，进一步合成负链DNA分子及核心蛋白、脂蛋白等蛋白质，最后，以负链DNA为模板，合成正链DNA，正负链组成新的rcDNA，一部分由脂蛋白包绕形成HBV病毒颗粒释放，另一部分变成cccDNA来维持胞核内cccDNA的水平。HBV感染过程如图一所示[3]：
新合成的HBV会感染新的肝细胞重复上述过程，当胞核中cccDNA的含量过高时，直接以cccDNA为模板合成HBV，使cccDNA动态维持在某一水平，在肝内形成了“cccDNA池”。可以看出cccDNA是HBV复制的重要中间体，且cccDNA对常规的抗病毒药具有抵抗作用[4] ......
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